[发明专利]铁皮石斛的种子组培快速繁殖方法

权利要求书

1.铁皮石斛的种子组培快速繁殖方法，其特征是依次包括以下步骤：

1)、取材：

选用生长健壮的铁皮石斛上结的果龄150天以上未开裂的成熟蒴果，将其洗净、沥干后备用；

2)、种子的诱导萌发与分化：

将步骤1)所得的蒴果经消毒后，切除其首尾两端各0.3～0.7cm后纵向剖开，取出种子，将种子均匀接种到种子萌发分化培养基上进行培养；

培养条件为：

首先进行暗培养10±1天，温度为25±1℃；

之后每天进行14小时光照，光照强度30～40μmol m^-2·s^-1，温度为25±1℃；10小时暗培养，温度为21±1℃；上述光照和暗培养交替进行；

3)、幼苗的增殖：

待种子萌发并分化形成有两片小叶的幼苗时，将所得的幼苗转接于幼苗增殖培养基进行增殖培养，获得丛生苗；

培养条件为：16小时光照，光照强度30～40μmolm^-2s^-1，温度为25±1℃；8小时暗培养，温度为21±1℃；上述光照和暗培养交替进行；

4)、生根壮苗：

待增殖培养获得的丛生苗长至2-3cm高时，将丛生苗从基部进行分割形成单株小苗，转移到生根壮苗培养基上进行生根壮苗培养；

培养条件为：16小时光照，光照强度30～40μmoLm^-2s^-1，温度为25±1℃；8小时暗培养，温度为21±1℃；上述光照和暗培养交替进行；

5)、移栽：

待生根壮苗培养获得的小苗长至4.0～5.0cm高、且长出长度大于等于2cm的根至少2条时，获得可出瓶种植种苗。

2.根据权利要求1所述的铁皮石斛的种子组培快速繁殖方法，其特征是：

所述步骤2)中的种子萌发分化培养基为：MS+NAA0.05～0.15mg/L+蔗糖25～35g/L+琼脂5～10g/L+0.3～0.7g/L活性炭，pH为5.5～6。

3.根据权利要求2所述的铁皮石斛的种子组培快速繁殖方法，其特征是：

步骤3)中的幼苗增殖培养基为：MS+NAA0.15～0.2mg/L+蔗糖25～35g/L+琼脂5～10g/L+活性炭0.3～0.7g/L，pH为5.5～6。

4.根据权利要求3所述的铁皮石斛的种子组培快速繁殖方法，其特征是：

步骤4)中的生根壮苗培养基为MS+BA0.3～0.7mg/L+NAA0.3～0.7mg/L+蔗糖25～35g/L+琼脂5～10g/L+活性炭0.3～0.7g/L，pH为5.5～6。

5.根据权利要求1～4任一所述的铁皮石斛的种子组培快速繁殖方法，其特征是：

首先将所得可出瓶种植的种苗同培养容器转移至拟驯化移栽的遮阴大棚中炼苗5～7天；

然后打开瓶盖，在生根壮苗培养基表面浇水，令生根壮苗培养基含水量为10±1％，再于遮阴大棚中下放置2～3天后，将种苗基部的生根壮苗培养基洗净，晾干至根系发白；

最后将种苗以3～5棵为一丛移栽于的混合基质中，于遮阴大棚中进行培养；

所述遮阴大棚的透光率为60±5％，遮阴大棚内温度为20～28℃，相对湿度为80±5％；

所述混合基质为松树锯末和松树树皮按照1:1的体积比混合获得。

6.根据权利要求5所述的铁皮石斛的种子组培快速繁殖方法，其特征是：

所述步骤1)中洗净蒴果的方法为：将蒴果置于1％洗洁精溶液中摇洗10min，再取出蒴果用自来水冲洗干净，沥干备用。