[发明专利]一种抗肿瘤重组NMM融合抗原质粒DNA疫苗

说明书

本发明公开了一种抗肿瘤重组NMM融合抗原质粒DNA疫苗。所述抗肿瘤重组NMM融合抗原的设计方案为：通过连接臂GCAGCATAT将NY‑ESO‑1与MUCI基因的5’端相连，MUCI基因的3’端通过连接臂AAGAAG连接到MAGE‑A3编码基因的5’端。本发明NMM融合抗原靶点能够覆盖多种肿瘤，特别是一些体表肿瘤，例如乳腺癌、淋巴瘤、皮肤癌、甲状腺癌以及黑色素瘤。本发明的肿瘤质粒DNA疫苗pNMM是一种可通过局部注射就能产生高效的系统抗肿瘤免疫反应的新型免疫治疗药物，安全性和耐受性良好，具有发展为有效的抗肿瘤复发药物的潜力。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种抗肿瘤重组NMM融合抗原质粒DNA疫苗。

背景技术

当前，肿瘤是一个重要的公共卫生问题，也是世界各国的主要死亡原因之一。据全球肿瘤流行病统计数据预测，到2025年，全球每年新增患癌病例将增至2000万。据报道，多年来美国的癌症发病率和死亡率均在连续下降。这表明，通过医疗手段等方式可以达到对癌症的预防和控制。然而近年来，随着人口的增长和老龄化程度加剧，我国肿瘤患者发病率和死亡率持续走高。癌症依然是我国严重的疾病负担。因此，对肿瘤的预防、治疗以及预后的研究依然是重中之重。

肿瘤的治疗继单纯的手术切除、“杀敌一千自损八百的”放疗/化疗后，出现了第四大肿瘤治疗技术-免疫治疗，即通过靶向肿瘤细胞或者活化免疫细胞的方法，重新启动维持免疫系统对肿瘤细胞的识别杀伤，恢复机体正常的抗肿瘤免疫反应。斯隆凯特琳癌症中心发文指出，未来的肿瘤治疗应该是免疫治疗的相互结合，而不是单一的治疗方式。检查点类单抗、 CAR-T是当前肿瘤免疫治疗中的代表性手段，研究机构和研究者数量很多。虽然它们在一定程度上对肿瘤具有一些治疗效果，但是并没有达到预期，并且全身用药会诱发某些如细胞因子风暴类的不良反应，限制了其部分临床应用和发展。

治疗性肿瘤疫苗近年研究的热点之一，其原理是是将肿瘤靶抗原递送进入人体，诱导机体主动产生特异性免疫反应，阻止肿瘤的生长、扩散和复发，以达到清除或控制肿瘤的目的，是一种新型生物免疫技术药物。带有肿瘤特异性抗原(TSA)的免疫治疗可以启动以肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocyte，CTL)反应为主的抗肿瘤效应，有效打击肿瘤，防止转移、复发且不伤及无关组织，其抗肿瘤特异性和免疫记忆性是其他方法所不能比拟的。

该类药物可通过局部注射，安全性和耐受性很好，并且能够诱导系统免疫，是一种温和且有效的肿瘤治疗药物。在近十年时间里，肿瘤疫苗的发展速度并不是很快，随着技术的发展，特别是高通量测序、个体化治疗以及瘤内注射技术的发展，给肿瘤疫苗的发展带来新的动力。尤其是近两年，美国、德国两个研究小组的个性化肿瘤疫苗的高效临床试验结果的披露，以及斯坦福大学学者通过瘤内注射方式递送肿瘤疫苗所取得的震撼性动物实验结果，又将肿瘤疫苗的研究推向了风口浪尖，博得了众多研究机构和投资机构的关注。治疗性肿瘤疫苗是防治恶性肿瘤术后复发转移的重要技术手段，是生物医药领域重要的产业增长点。利用治疗性疫苗进行肿瘤的超早期干预以及预防术后复发，有可能为肿瘤的预防及治疗带来新希望。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗肿瘤重组NMM融合抗原质粒DNA疫苗。

一种抗肿瘤重组NMM融合抗原，所述抗肿瘤重组NMM融合抗原以MAGE-A3为主抗原框架，上游融合MUC1抗原CTL表位，下游融合NY-ESO-1抗原CTL表位。

所述抗肿瘤重组NMM融合抗原的设计融合方案为：通过连接臂GCAGCATAT将 NY-ESO-1与MUCI基因的5’端相连，MUCI基因的3’端通过连接臂AAGAAG连接到 MAGE-A3编码基因的5’端。

所述抗肿瘤重组NMM融合抗原的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。

所述抗肿瘤重组NMM融合抗原的基因序列如序列表SEQ ID NO：2所示。

含有上述抗肿瘤重组NMM融合抗原基因的质粒载体。