[发明专利]一种地克珠利对映体手性色谱分离分析方法

说明书

本发明公开了一种地克珠利对映体手性色谱分离分析方法，所述分离分析方法包括如下步骤：将手性固定相预处理，以正己烷、三氟乙酸和低级醇为流动相，进行液相色谱分离分析；所述预处理是用流动相冲洗手性固定相，冲洗时间不少于2小时，冲洗流速不大于0.5 mL·min^‑1；所述手性固定相为键合型对氯‑苯氨基甲酰化β‑环糊精、涂覆型纤维素三（3,5‑二甲基苯氨基甲酸酯）或涂覆型直链淀粉三（3,5‑二甲基苯氨基甲酸酯）；所述低级醇为乙醇、正丙醇、异丙醇或正丁醇；所述正己烷和低级醇的体积比为50~80∶50~20。本发明提供的手性色谱分离分析方法将所述手性固定相预处理，以正己烷、三氟乙酸和低级醇为流动相，实现了地克珠利对映体的手性色谱分离。

技术领域

本发明属于手性色谱分离技术领域，更具体地，涉及一种地克珠利对映体手性色谱分离分析方法。

背景技术

随着立体化学的发展，手性药物的立体选择性研究备受关注。具有相同物理化学性质的手性异构体在生物体内可能表现出截然不同的吸收、代谢、药理作用、致畸、致癌、致突变和内分泌干扰活性等性质。苯醚甲环唑的4种立体异构体对番茄早疫病菌、灰霉病菌、叶霉病菌、水稻纹枯病菌和西瓜炭疽病菌等的抑菌活性存在显著的差异，即(R,S)-苯醚甲环唑优于(R,R)-苯醚甲环唑、(S,R)-苯醚甲环唑、(S,S)-苯醚甲环唑[EnvironmentalScienceTechnology,2013,47(7):3386-3394]。在广谱抗蠕虫药吡喹酮中，(R)-异构体具有抗寄生虫作用，可使虫体皮层受到破坏并引起肌肉麻痹性收缩，而(S)-异构体不具抗虫活性[Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases,1998,16(5):335-341]；此外，(S)-吡喹酮对小鼠的急性半数致死量低于消旋吡喹酮和(R)-吡喹酮，表现较强的毒性[四川寄生虫科学杂志,1988,4:35-35]。左氧氟沙星的抗菌活性是右氧氟沙星的8～12倍，对多数肠杆菌科细菌有效，抗菌谱广、抗菌作用强，而右氧氟沙星几乎没有抗菌活性[New England Journal of Medicine,1991,324(6):384-394]。

地克珠利(Diclazuril)属于三嗪苯乙腈化合物，含有一个手性碳中心，有两种对映异构体(见式I)，化学名称为2,6-二氯-α-(4-氯苯基)-4-(4,5-二氢-3,5-二氧代-1,2,4-三嗪)-2(3H)-苯乙腈。该药最早由比利时杨森制药厂开发，并以杀球灵为商品名在英国、德国等43个国家上市。地克珠利是一种高效、低毒的抗球虫药物，以饲料添加剂的形式用于禽类，可以有效预防和杀灭多种原虫，对所有感染鸡、火鸡和其他鸟类的致病性艾美尔球虫等有效，特别是对柔嫩、堆型、布氏、巨型和缓艾美尔球虫的抗球虫指数均超过180[Veterinary Parasitology,2003,116(4):305-314；中国兽医杂志,2009,45(6):27-28]。此外，地克珠利对兔、牛和羊的球虫感染表现出良好的抗虫效果[畜牧与兽医,2015,47(10):121-123；中国兽医寄生虫病,2007,15(3):15-17；Small Ruminant Research,2013,110(2-3):93-95]。

地克珠利因其高效、广谱及低毒的特点被广泛地使用，然而，过度使用会使动物体产生日趋严重的抗药性，同时药物在动物体内的残留增加了人类的危害。目前，主要采用液相色谱法[分析实验室,2014,33(4):420-423]和液质联用法[Chromatographia,2012,75(11-12):645-653]检测动物体及组织样品(如鸡肉、鸡蛋、猪肉、兔肉和牛奶等)中的地克珠利。然而，尚未见在手性色谱柱上对地克珠利对映体进行液相色谱手性分离技术的相关报道。

因此，开发一种手性色谱分离分析技术对于地克珠利的手性拆分和对映异构体的分析检测具有积极意义。

发明内容

本发明的目的在于弥补现有技术中地克珠利对映体手性分析分离方法的不足，提供一种地克珠利对映体手性色谱分离分析方法。