[发明专利]一种发酵培养基及由发酵培养基制备莫匹罗星的方法

说明书

本发明公开一种发酵培养基及由发酵培养基制备莫匹罗星的方法，首先选育出生长状态良好，生命力旺盛，代谢能力强的荧光假单胞杆菌，然后通过调配培养基，荧光假单胞杆菌进行菌种活化，为挑选最佳的菌种做准备；然后通过将其接种于特制的种子培养基上，扩大优良的荧光假单胞杆菌的菌群数量，培养至对数期，得到种子菌液，最后将种子菌液接种至特制的发酵培养基上。本发明提供的培养基既能够为荧光假单胞杆菌提供充足的营养，又能促进荧光假单胞杆菌加快生长代谢速度，从而得到含有莫匹罗星的发酵液，发酵液中莫匹罗星含量为6000ug/mL以上。

技术领域

本发明涉及药物领域，尤其涉及一种发酵培养基及由发酵培养基制备莫匹罗星的方法。

背景技术

莫匹罗星，也称作假单胞菌酸A，是一种主要对革兰氏阳性菌[如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)]和一些革兰氏阴性菌[如流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)、淋病奈瑟氏球菌(Neisseriagonorrhoeae)]具有生长抑制作用的抗生素[A.Ward,D.M.Campoli-Richards,Drugs 32,425-444(1986)]。通过抑制异亮氨酸-tRNA合酶，影响病原菌的肽合成。该抗生素的一个有利特征是它对人和动物具有非常低的毒性且其在埃姆斯(Ames)试验中为阴性，目前莫匹罗星多用于人的治疗，以治疗皮肤感染(例如脓疱病、脓皮病)、鼻和外耳感染、痤疮、烧伤、湿疹、牛皮癣、在溃疡情况中用于治疗二次感染，和用于预防医院感染。

已知荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)能够产生莫匹罗星，但目前的制备方法发酵水平低，得到的发酵液中莫匹罗星的含量一般只为3000-4000ug/ml。

发明内容

为此，需要提供一种既能够为荧光假单胞杆菌提供充足的营养，又能促进荧光假单胞杆菌加快生长代谢速度的发酵培养基；同时还提供由发酵培养基制备莫匹罗星的方法，提高发酵液中莫匹罗星的含量。

为实现上述目的，发明人提供了一种用于制备莫匹罗星的发酵培养基，所述发酵培养基包括以下重量百分含量的组分：

所述发酵培养基的PH值为6.0-7.0；

所述生长促进剂为下列中的一种或两种的混合：亮氨酸或甜菜碱。

本发明所述的发酵培养基不仅含有碳源，还含有氮源、无机盐、生长促进剂等组分，既能够为荧光假单胞杆菌提供充足的营养，又能促进荧光假单胞杆菌加快生长代谢速度，进而使发酵液中莫匹罗星的含量提高。

优选的，所述碳源为下列中的一种或两种以上的混合：葡葡糖、蔗糖、甘油、豆油、花生油或淀粉。所述碳源为菌体生长繁殖提供所需的能量和合成菌体所需的碳成分。

优选的，所述氮源为下列中的一种或两种以上的混合：酵母粉、酵母膏、玉米蛋白粉、黄豆饼粉、蛋白胨、棉子精粉或玉米浆。所述氮源用于构建菌体细胞物质(氨基酸、蛋白质和核酸等)。

优选的，所述无机盐为下列中的一种或两种以上混合的盐：铵盐、钙盐、钠盐、钾盐、铁盐或磷盐。所述无机盐可构成菌体细胞成份,作为酶的组成部分、酶的激活剂或抑制剂，还可调节培养基的渗透压、PH、氧化还原电位等。

优选的，所述消沫剂为有机硅消泡剂。更优选的，本发明的消泡剂为市售产品，采购于陶氏公司公司，牌号为P-2000。

本发明还提供一种应用所述的发酵培养基制备莫匹罗星的方法，其包括以下步骤：

1)筛选荧光假单胞杆菌：挑选生长状态良好的荧光假单胞杆菌；