[发明专利]一种香椿根穗的组培方法

说明书

本发明公开了一种香椿根穗的组培方法，包括如下步骤：采根及预处理，制根穗及表面消毒，催芽培养，炼苗。本发明的优点在于：(1)材料来源丰富；(2)再生效率高，不定芽诱导率高达85％；(3)再生速度快，繁殖系数高，能良好的保持母株的优良性状；(4)操作步骤少，培育周期短，经济效益高。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种香椿根穗的组培方法。

背景技术

香椿(Toona sinensis)，别名春芽树、红椿，椿树，为楝科香椿属高大落叶乔木，其嫩芽具有特殊香气和含有蛋白质、钙、维生素C、磷、胡萝卜素等极丰富的营养物质而被人蔬食，其木材赤褐色而带红，为上等的家具用材，国外市场上称为“中国桃花心木”。香椿在我国分布广泛，广植于西南部经中部至北部，尤以河北、山东两省为多，安徽省太和县也是香椿的产区，一般多栽植于房前，屋后，地畔，路旁，山溪，河边等处。香椿作为优良的木本蔬菜，因其具有生长速度、生态适应性强、营养价值高等优势而广受人们的喜爱，人们对香椿的需求也日益增大。

香椿可以使用种子繁殖，虽然香椿种子育苗有利于香椿大面积造林的发展，但由于利用种子育苗时存在性状分离和遗传变异等问题，很难保持母本株系的优良性状；但是香椿种子使用寿命较短，贮藏半年后其发芽率显著下降，生产上必须注意使用新种。香椿也可以采用播种和扦插等传统的手段进行繁殖，但是受到材料的影响，繁殖系数与繁殖速度很难满足育种需求，且繁殖过程易受季节限制。

植物组培技术繁育周期短，繁殖系数高，所需要的外植体材料少，可在短期内获得大量的与母株性状相同的植株幼苗，在优质苗木的规模化繁育中具有重要作用。但是目前，香椿离体繁育的研究不多。

发明内容

针对上述问题，同时为了满足规模化种植和保持母本株系的优良性状，本发明提供了一种香椿根穗的组培方法，包括如下步骤：

(1)采根及预处理

3月初选取田间多年生香椿优良株系采根，在母株基部1～2m处开沟，挖出1～2年生的根蘖苗，起苗后保持根蘖苗湿度，

(2)制根穗及表面消毒

将步骤(1)获得的根粗为1～1.5cm的根蘖苗剪成长度5-10cm的，上端剪成平口，下端剪成斜口的根段并带有须根的根穗，用自来水冲洗3次清洁泥土；将香椿根穗转移至无菌操作台后用70-75％的酒精消毒30-40S，用无菌水冲洗2-3次；然后用1％的升汞溶液消毒5-10min，用无菌水冲洗5次；

(3)催芽培养

将步骤(2)完成消毒的香椿根穗斜口根段以斜口根段向下接种于不定芽诱导培养基中进行不定芽的诱导培养；待香椿根穗诱导出不定芽丛后，将长有不定芽丛的香椿根穗转接于不定芽增殖培养基中进行不定芽的增殖培养；其中，不定芽诱导培养基为下层添加0.05-0.1％的玉米素、0.1-0.5％三十烷醇、1-3％蔗糖、0.6-0.8％琼脂的MS固体培养基和上层添加0.05-0.1％的玉米素、0.1-0.5％三十烷醇、1-3％蔗糖的MS液体培养基，不定芽增殖培养基为上层添加0.1-0.3％的玉米素、1-3％蔗糖、0.6-0.8％琼脂的MS固体培养基和下层添加0.1-0.3％的玉米素、1-3％蔗糖的MS液体培养基，所述诱导培养、增殖培养于光照培养箱中进行培养，温度22-28℃、每天2000-3000Lx、光照12-16小时，

(4)炼苗

将步骤(3)中具有2-3个完全伸展的叶子的香椿根穗冲洗干净根部培养基，转移至含有营养土的营养穴中，叶面喷雾0.1％的信号施康乐一次，每天喷雾1-2次保持湿度，在室温和自然光照条件下培养15-30天后进行田间移栽。

进一步的技术方案，所述步骤(1)用自来水清洁后的香椿根穗先将2cm的斜口根段在100mg/L的吲哚丁酸溶液中浸泡24h；