[发明专利]发酵生产L-氨基酸的方法

权利要求书

1.一种棒状杆菌属(Corynebacterium)的细菌，其具有分泌选自蛋白源性L-氨基酸和L-鸟氨酸的L-氨基酸的能力，其中在所述细菌的染色体内，编码与SEQ ID NO:8的氨基酸序列至少90％相同且赋予大肠杆菌(Escherichia coli)对选自红霉素、四环素、嘌呤霉素和博来霉素的至少一种抗生素的抗性的多肽的多核苷酸被修饰，所述修饰通过至少缺失所述多肽的编码序列对应于SEQ ID NO:8的氨基酸序列的第149至251位、第41至344位或第14至435位的氨基酸的一部分，或通过至少缺失编码所述多肽的完整核苷酸序列来进行。

2.权利要求1的细菌，其中所述多核苷酸通过至少缺失编码所述多肽的完整核苷酸序列和邻接终止密码子而进行修饰。

3.权利要求1或2的细菌，其中在所述细菌的染色体内的所述多核苷酸的修饰导致限制性酶EcoRV识别位点的插入。

4.权利要求1至3任一项的细菌，其中所述细菌属于物种谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)。

5.权利要求1至4任一项的细菌，其中所述L-氨基酸选自蛋白源性L-氨基酸L-赖氨酸、L-缬氨酸、L-苏氨酸、L-异亮氨酸、L-组氨酸和L-脯氨酸。

6.权利要求5的细菌，其中所述L-氨基酸是L-赖氨酸。

7.权利要求1至6任一项的细菌，其中在所述多核苷酸修饰之前，所述多肽的氨基酸序列包含459个氨基酸。

8.权利要求7的细菌，其中在所述多核苷酸修饰之前，所述多肽包含SEQ ID NO:8或SEQID NO:10或SEQ ID NO:12的氨基酸序列。

9.权利要求8的细菌，其中在所述多核苷酸修饰之前，所述多肽包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列。

10.权利要求9的细菌，其中在所述多核苷酸修饰之前，编码所述多肽的核苷酸序列包含SEQ ID NO:7的核苷酸序列的第1001至2377位或其中第2341位的胞嘧啶(c)被胸腺嘧啶(t)置换的SEQ ID NO:7的第1001至2377位。

11.用于发酵生产选自蛋白源性L-氨基酸和L-鸟氨酸的L-氨基酸的方法，包括以下步骤：

a)在合适的培养基中，在合适的条件下培养权利要求1至10中任一项的细菌，

b)在培养基中积聚所述L-氨基酸以形成含有L-氨基酸的发酵液。

12.权利要求11的方法，其中所述L-氨基酸选自蛋白源性L-氨基酸L-赖氨酸、L-缬氨酸、L-苏氨酸、L-异亮氨酸、L-组氨酸和L-脯氨酸。

13.权利要求12的方法，其中所述L-氨基酸是L-赖氨酸。

14.权利要求11至13任一项的方法，还包括浓缩所述含有L-氨基酸的发酵液。

15.权利要求11至14任一项的方法，还包括干燥所述含有L-氨基酸的发酵液的步骤。

16.权利要求11至14任一项的方法，还包括从所述含有L-氨基酸的发酵液纯化所述氨基酸的步骤。