[发明专利]一种DOM影响白腐菌降解PAHs的研究方法

说明书

本发明公开了一种DOM影响白腐菌降解PAHs的研究方法，该方法包括以下步骤：Step1、确定研究内容，研究内容包括：1)确定DOM对土壤吸附PAHs的影响作用的内容；2)确定DOM对白腐菌生长及其关键酶分泌过程的影响内容；3)确定DOM促进白腐菌降解土壤PAHs的作用机制的内容；Step2、确定研究方案，研究方案包括：(1)PAHs的选取；2)土壤样本的采集；(3)DOM的制备；(4)DOM元素组成分析；5)菌种选取；6)PDA液体培养基制备；7)磨口玻璃柱装置制作；8)静止培养；Step3、方案的实施；Step4、数据采集及数据分析；Step5、得出结论。该研究方法更加详实、具体，使土壤有机物污染分解实验更加规范，同时为土壤污染有机物分解产品的推出提供研究基础。

技术领域

本发明涉及土壤有机物污染降解领域，具体涉及一种DOM影响白腐菌降解PAHs的研究方法。

背景技术

生物修复是土壤多环芳烃(PAHs)污染修复的有效手段。多环芳烃(PAHs)是含有两个或以上的闭合苯环的碳氢化合物，具有半挥发性、疏水性、生物积累性等特点，不易被降解，PAHs通过分配作用吸附在土壤有机质中，再加上土壤微小孔隙的截留，容易被土壤绑定、老化而长期停留在土壤中，使得PAHs在土壤中的生物有效性和生物可及性大大降低，造成土壤PAHs污染修复困难。由于微生物体对PAHS的吸附由分配作用主导，且吸附-解吸过程是可逆的，吸附在菌体上的PAHs可以解吸出来而发生降解，也可在菌体上直接发生降解作用,因此，增大生物吸附，促进生物降解，成为生物修复土壤PAHs污染的有效手段。水溶性有机物(Dissolved Organic Matter,DOM)是指土壤和水体中由一系列大小、结构不同的分子组成的，能通过0.45μm滤膜的、能溶于水的有机物的总称，仅占土壤有机质的很小部分，能显著影响土壤PAHs的浓度，制约其在土壤中的迁移、转化、降解等化学和生物学过程，该作用对微生物降解PAHs的影响很大。

DOM的主要成分是碳水化合物，在碳源的利用方面白腐菌将优先利用低分子量的DOM为碳源繁殖，同时由于高分子量的DOM的增溶，可溶性PAHs增多，且污染土壤含PAHs的环境对白腐菌的生长和适应起了潜在的驯化和诱导作用，当白腐菌利用完DOM的可利用碳源和土壤的其它营养后，菌丝生物量会迅速增加，吸附PAHs的量也会增大。此时土壤的碳、氮出现限氮条件，刺激白腐菌启动木素降解酶系的表达，降解吸附态和水溶态的PAHs。其过氧化物酶系的产生与途径和DOM的组成、土壤环境条件密切相关，特别是DOM的分子量、土壤营养条件碳、氮浓度与过氧化物降解酶系的产生机制及其相关性，是本发明要解决的关键问题之一。土壤pH值不仅影响白腐菌菌丝的生长，还影响DOM在土壤固/液两相的平衡分配过程；温度则主要影响白腐菌对PAHs的代谢及其菌群结构和PAHs的膜毒性。因此，复杂的土壤环境下DOM对白腐菌降解土壤PAHs的影响很大，值得深入探讨。

发明内容

本发明为了解决上述问题，公开了一种DOM影响白腐菌降解PAHs的研究方法，该研究方法为土壤有机物污染降解提供了一条切实可行的思路，并为解决土壤污染问题打下坚实的理论基础。

该发明的实现主要包括以下技术内容：

一种DOM影响白腐菌降解PAHs的研究方法，包括以下步骤：

Step1、确定研究内容，研究内容包括以下几个方面：

(1)确定DOM对土壤吸附PAHs的影响作用的内容：对模型DOM进行分子量分级，极性、非极性和组分的分离，定量分析土壤在不同条件下、不同培养方式对PAHs的吸附作用，深入研究大分子量的DOM增溶PAHs对土壤吸附的影响过程，探明不同极性、不同分子量、不同组分的DOM对土壤吸附PAHs的影响作用；