[发明专利]一种检测大青叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的高效液相方法

说明书

本发明提供了一种可适用于整体控制大青叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒质量的高效液相特征图谱检测方法。本发明的HPLC特征图谱检测方法，能整体控制大青叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒中的特征成分，确保大青叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒整体质量的稳定，且方法操作简单，精密度高，稳定性好，重复性好，准确度高。

技术领域

本发明具体涉及一种大青叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的HPLC检测方法。

背景技术

大青叶为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥叶，具有清热解毒，凉血消斑的功效，用于温病高热，神昏，发斑发疹，作腮，喉痹，丹毒，痈肿，为临床常用中药品种。大青叶中主要含有靛蓝、菘蓝苷、靛玉红、色胺酮、喹唑酮等成分。现代研究表明，大青叶具有抗病原微生物，抗内毒素，抗氧化等药理活性，这些化学成分的整体组成与含量是大青叶发挥临床疗效的基础，因此，要确保其临床疗效，需要对其药效成分进行整体质量控制。

目前，《中国药典》2015年版一部大青叶项下仅收载采用高效液相色谱法测定靛玉红单一成分含量的方法，尚未进行其特征图谱控制。其他有部分文献研究报道建立了大青叶饮片、注射剂的指纹图谱，如李环环，王英姿，梁丽丽，等.不同产地大青叶饮片反相高效液相色谱指纹图谱研究[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(24):81-85；刘瑞,刘志刚,李磊，等.复方大青叶注射液HPLC指纹图谱研究[J].中国中药杂志,2006,31(13):1059-1062.分别收载了用于控制大青叶饮片、注射剂指纹图谱的高效液相色谱法。

然而，上述报道是均是单独针对大青叶饮片和注射剂研究建立的指纹图谱，检测方法各不相同，也未见大青叶标准汤剂、配方颗粒指纹图谱研究的报道。因此，现有的检测方法难以有效对比和分析大青叶饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的差异与变化，难以深入认识大青叶药效物质基础在从原料到配方颗粒成品的工艺过程的传递情况，难以整体评价和控制从大青叶饮片到配方颗粒成品的工艺过程。因此，建立统一的大青叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱测定方法，有利于整体评价大青叶相关工艺过程的科学性、合理性，更能整体控制大青叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的内在质量，确保大青叶的临床疗效。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种适用于大青叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱测定的HPLC检测方法。

本发明的整体控大青叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的高效液相特征图谱检测方法，包括如下操作步骤：

1)对照品溶液制备：取对照品，溶解，即得对照品溶液；

2)对照药材溶液制备：取大青叶对照药材，经提取，即得对照药材溶液；

3)分别吸取对照品溶液、对照药材溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：240～270nm；流动相：甲醇为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱程序如下：

其中，步骤1)所述对照品包括：尿苷、次黄嘌呤、腺苷、鸟苷、紫丁香苷、异荭草苷、异牡荆苷、异金雀花素八种对照品。

其中，步骤1)所述溶解是加入甲醇或水溶解。

其中，步骤2)所述提取是指：加入水，超声提取。

优选地，所述提取方法如下：

取大青叶药材或饮片，加入16.7倍水，或取大青叶标准汤剂粉末，加入50倍水，或取大青叶配方颗粒研细后粉末，加入25倍水；超声提取20分钟，放冷，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得大青叶标准汤剂或配方颗粒的供试品溶液；所述超声提取的功率为600W、频率为40kHz。