[发明专利]与黄瓜抗白粉病紧密连锁的两个SNP标记及其应用有效
| 申请号: | 201810861509.3 | 申请日: | 2018-08-01 |
| 公开(公告)号: | CN109234429B | 公开(公告)日: | 2021-07-20 |
| 发明(设计)人: | 许学文;王维;陈学好;齐晓花;徐强 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 薛海霞;董建林 |
| 地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 黄瓜 白粉病 紧密 连锁 两个 snp 标记 及其 应用 | ||
1.一组用于检测与黄瓜抗白粉病紧密连锁的两个SNP标记的dCAPS引物对,其特征在于,两个SNP标记是pm5_01和pm5_02,其中pm5_01位于黄瓜基因组9930 V2 第5号染色体16,786,038处,pm5_02位于黄瓜基因组9930 V2 第5号染色体16,996,485处;pm5_01处碱基为A的黄瓜为高抗白粉病品种,pm5_01处碱基为G的黄瓜为高感白粉病品种;pm5_02处碱基为C的黄瓜为高抗白粉病品种,pm5_02处碱基为G的黄瓜为高感白粉病品种;所述引物对包括pm5_01的正向引物5′-AACTCATACTCACACTCACACTCACACTCA-3′,
pm5_01的反向引物5′-CCAAGTAGCGGCTGATAGGT-3′;
pm5 _02的正向引物5′-AAACCTATCTAACTTGATGGACCCT-3′,
pm5_02的反向引物5′-ACGTGGAATTCTTTTATTTTCTTGA-3′。
2.权利要求1所述的dCAPS引物对在黄瓜抗白粉病分子标记辅助育种中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于,具体方法是:
1) 提取待检测黄瓜基因组DNA;
2) 以待检测黄瓜基因组DNA为模板,利用权利要求2所述的引物对,进行PCR扩增;
3)使用限制性内切酶DdeI对pm5_01引物扩增的PCR产物进行酶切;使用限制性内切酶MnlI对pm5_02引物扩增的PCR产物进行酶切;
4)经上述酶酶切后将产物进行电泳检测,根据电泳检测结果确定黄瓜对白粉病的抗性。
4.权利要求1所述的dCAPS引物对在黄瓜抗白粉病抗病基因克隆中的应用。
5.权利要求1所述的dCAPS引物对在抗白粉病黄瓜新品种选育中的应用。
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