[发明专利]基于电喷雾质子化裂解定量中药三萜皂苷含量所需碰撞能的预测方法

说明书

本发明公开了一种基于电喷雾质子化裂解定量中药三萜皂苷含量所需碰撞能的预测方法，所述预测方法包括：(1)选取以三萜皂苷为主要活性成分的药用植物为代表植物；(2)从中选取具有代表性的三萜皂苷模型化合物；(3)基于电喷雾质子化裂解定量药用植物中三萜皂苷含量；采用以下方程式预测所需碰撞能：CE＝0.0337*Q₁+0.5686，Q₁＝[M+H/NH₄]⁺，Q₁线性范围为600‑1600Da，R²＝0.91；CE＝0.0337M_w+0.9361，M_w线性范围为600‑1600Da，R²＝0.9096。本发明预测方法所得到CE值与单因素考察法所得CE值无显著差异，说明本发明预测方法能应用于三重四级质谱的检测。

技术领域

本发明涉及一种分析定量中药三萜皂苷含量所需碰撞能的预测方法，尤其涉及一种基于电喷雾质子化裂解-多反应监测质谱定量中药三萜皂苷所需理想碰撞能的快速预测方法，属于中药三萜皂苷含量的定量检测领域。

背景技术

三萜皂苷在含有甲酸或甲酸氨的流动相中形成稳定的[M+H]⁺和/或[M+NH₄]⁺分子离子峰，运用液相色谱-串联四级杆质谱联用仪，采用电喷雾阳离子串联质谱检测模式(ESI⁺-MRM)，确定了可预测的MRM靶向离子对，其Q₁和Q₃计算公式分别为：Q₁＝[M+H/NH₄]⁺，Q₃＝[苷元+H-nH₂O]⁺。

其中，去簇电压(DP)和碰撞能(CE)是产生高强度Q₁/Q₃离子对的关键重要参数，且CE较DP对质子化裂解Q₁/Q₃离子对响应值产生更大的影响。本发明人课题组前期，通过传统的注射泵法、单因素实验法和响应面法优化CE，但当涉及到多个三萜皂苷同时分析时，采用这些方法获取最优化碰撞能比较费时费力，因此亟待需要提供一种简捷、准确的基于电喷雾质子化裂解定量中药三萜皂苷含量所需碰撞能的预测方法。

发明内容

基于以前公开的一种利用电喷雾质子化裂解-质谱多反应检测模式对中药中三萜皂苷进行定性和定量的方法，确定了可预测的MRM靶向离子对，其Q₁和Q₃计算公式分别为：Q₁＝[M+H/NH₄]⁺，Q₃＝[苷元+H-nH₂O]⁺。去簇电压(DP)和碰撞能(CE)是产生高强度的质子化裂解Q₁/Q₃离子对的关键重要参数。在对来自于20种不同中药或草药来源的85个三萜皂苷研究的基础上，发现DP值设置具有普遍性，而CE值难于预测和优化，且CE较DP对质子化裂解Q₁/Q₃离子对响应值产生更大的影响；基于此，本发明的主要目的在于建立一种基于电喷雾质子化裂解定量中药三萜皂苷所需理想碰撞能的预测方法。

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：

一种基于电喷雾质子化裂解定量中药三萜皂苷含量所需碰撞能的预测方法，包括：