[发明专利]去引物二聚体的方法有效
| 申请号： | 201810847747.9 | 申请日： | 2018-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN108913685B | 公开（公告）日： | 2019-07-09 |
| 发明（设计）人： | 袁晓琴;廖世玉;杨丽 | 申请（专利权）人： | 迈凯基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京派特恩知识产权代理有限公司 11270 | 代理人： | 王子晔;张颖玲 |
| 地址： | 611731 四川省成*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物二聚体 超滤离心 核酸纯化 试剂组合 磁珠法 磁珠 应用 | ||
1.一种去PCR产物中引物二聚体的方法，包括：
1）采用超滤离心法对PCR产物进行纯化，其中，超滤离心法中所使用的离心参数为8000×g ~15000×g，40秒~5分钟；所使用的超滤离心管的截留分子量为50kD~100kD；
2）使用磁珠法对1）中获得的产物进行纯化，以进一步去引物二聚体，其中，所使用的磁珠表面包被着羧基基团，所述PCR产物与磁珠试剂的体积比为1:1.0~1.8；
其中，所述PCR产物和引物二聚体的大小差值为20bp~170bp。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述PCR产物和引物二聚体的大小差值为26bp~167bp。
3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述PCR产物和引物二聚体的大小差值为30bp~100bp。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，超滤离心法中所使用的离心参数为10000×g ~14000×g，1~4分钟。
5.根据权利要求4所述的方法，其中，超滤离心法中所使用的离心参数为11000×g ~13000×g，1.5~2.5分钟。
6.磁珠试剂在权利要求1所述的去PCR产物中引物二聚体的方法中的应用，其中，所述磁珠试剂被用来处理经超滤离心后的PCR产物，并且所述PCR产物与引物二聚体的大小差值为20bp~170bp。
7.根据权利要求6所述的应用，其中，所述PCR产物和引物二聚体的大小差值为26bp ~167bp。
8.根据权利要求7所述的应用，其中，所述PCR产物和引物二聚体的大小差值为30bp~100bp。
9.根据权利要求6所述的应用，其中，超滤离心中所使用的离心参数为10000×g ~14000×g，1~4分钟。
10.根据权利要求9所述的应用，其中，超滤离心中所使用的离心参数为11000×g ~13000×g，1.5~2.5分钟。
11.试剂组合在权利要求1所述的去PCR产物中引物二聚体的方法中的应用，其中，所述引物二聚体经PCR反应产生，所述引物二聚体与PCR产物的大小差值为20bp~170bp，所述试剂组合包括超滤离心管和磁珠试剂。
12.根据权利要求11所述的应用，所述PCR产物和引物二聚体的大小差值为26bp ~167bp。
13.根据权利要求12所述的应用，所述PCR产物和引物二聚体的大小差值为30bp~100bp。
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