[发明专利]一种具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的鲎血蛋白水解肽的制备方法有效
| 申请号： | 201810844107.2 | 申请日： | 2018-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN108866135B | 公开（公告）日： | 2021-06-01 |
| 发明（设计）人： | 邓春梅;洪鹏志;康信煌;何兰珍;张国光 | 申请（专利权）人： | 广东海洋大学 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06 |
| 代理公司： | 广州市南锋专利事务所有限公司 44228 | 代理人： | 李慧 |
| 地址： | 524000 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 具有 葡萄 糖苷酶 抑制 活性 蛋白 水解 制备 方法 | ||
1.一种具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的鲎血蛋白水解肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将鲎血血细胞置于低温下冷冻，然后在4℃融化，反复三次；在4℃下磁力搅拌5-10min，使鲎血细胞破裂；
（2）将步骤（1）处理后的鲎血血细胞低温离心，离心转速4000-5000r/min，收集固体沉淀，并用蒸馏水冲洗，即得到鲎血细胞组织；
（3）用碱性蛋白酶酶解鲎血细胞组织，酶解条件：pH 9.0-11.0，酶解温度48-58℃，酶浓度 1.5-2.5mg/mL，底物浓度5.0-7.0mg/mL，酶解时间4-6h，得酶解液；
（4）将酶解液置于低温冷冻离心机中，离心分离，得上清液，冷冻干燥上清液，获得鲎血细胞蛋白水解肽。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述鲎血血细胞置于-18℃下低温冷冻12h，然后4℃融化，在4℃下磁力搅拌10min。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述低温为4℃；离心转速4000r/min，离心时间20min；蒸馏水冲洗至无杂质。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述碱性蛋白酶用量为2mg/mL。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述酶解条件为：pH10.0，酶解温度55℃，酶浓度2mg/mL，底物浓度6.4mg/mL，酶解时间5h。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述低温为4℃，离心分离条件为4000 r/min离心20min。
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