[发明专利]一种封闭型DNA荧光生物传感器及其在检测甲型H1N1流感病毒中的应用

说明书

本发明公开了一种封闭型DNA荧光生物传感器及其在检测甲型H1N1流感病毒中的应用。该传感器包括辅助探针、信号探针和能够与信号探针进行特异性结合的荧光染料；其中，信号探针的序列为5'‑TCCTATTGTGACTTTGGGTAGGG CGGGTTGGG‑3'；辅助探针的序列为5'‑GCCCTACCCGGGTGTATATTCTG‑3'。本发明的封闭型DNA荧光生物传感器通过荧光值的变化，能够快速检测甲型H1N1流感病毒的特异性单链DNA序列浓度，具有灵敏度高、特异性好、便于标准化操作、适用于临床筛查等优点，为甲型H1N1流感病毒快速检测产品的开发提供了一定的理论指导，对流行病毒的临床监控具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物化学分析技术领域。更具体地，涉及一种封闭型DNA荧光生物传感器及其在检测甲型H1N1流感病毒中的应用。

背景技术

H1N1是正黏液病毒科的一种RNA病毒，经过H1N1病毒的宿主的变异和传播，将会导致疫情以及人类的流感大面积的爆发与传播。2009年3月，在美国、墨西哥等国家爆发了这种新型甲型H1N1流感病毒，随后在世界范围快速蔓延，导致了一场大型的病毒灾难，对人和动物的危害都极为严重。在H1N1流感病毒疫情流行的后期，流感疫情依旧在不同地区不间断的爆发，并且流感病毒极大可能会变异并产生抗药性质，变异会让其变成更为容易传播的流感病毒及致病菌，严重影响着全球人类和动物的健康以及公共卫生安全。因此为筛选流感可疑病例，控制流感病毒的蔓延，并同时监控这种病毒在动物中的流行情况，迫切需要开发针对这种新型甲型H1N1流感病毒的快速有效的检测方法。

目前，国内外检测和诊断甲型H1N1流感病毒的方法很多，主要包括传统的病毒分离鉴定方法、免疫荧光法、实时荧光定量PCR等技术方法。传统的分离培养检测技术培养时间较长，操作过程相对复杂，要在无菌条件下操作，并对操作者的相关专业知识和操作技术要求都比较高，限制了这种方法在临床以及非实验室环境的应用。免疫荧光通过荧光显微镜来观察是否有病毒抗原存在从而可以判断是否被病毒感染，其灵敏度与操作人员采集标本的质量、样本的含量以及相关专业操作技术有密切关系，所以免疫荧光的灵敏度并没有预期的那样稳定，需要进一步改进与完善。实时荧光定量PCR检测具有较高的特异性和敏感性，但也会出现假阴性结果，在整个检测过程中，对操作人员、精密实验仪器和整体实验室设施的要求都有较高的技术要求，不适合基层大规模筛选检测。

因此，迫切需要发展方便快捷、高灵敏度、高特异性和适宜于临床筛查的诊断方法来满足甲型H1N1流感病毒的检测需要。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服上述现有技术的缺陷和不足，提供一种特异性和灵敏度高、选择性好、检测速度快的能够检测单链DNA的封闭型DNA荧光生物传感器。该封闭型DNA荧光生物传感器通过荧光值的变化，能够快速检测甲型H1N1流感病毒的特异性单链DNA序列浓度，为甲型H1N1流感病毒快速检测产品的开发提供了一定的理论指导，对流行病毒的临床监控具有重要意义。

本发明的目的是提供一种封闭型DNA荧光生物传感器。

本发明的第二个目的是提供上述封闭型DNA荧光生物传感器在检测甲型H1N1流感病毒中的应用。

本发明的第三个目的是提供一种检测甲型H1N1流感病毒的方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

一种封闭型DNA荧光生物传感器，包括辅助探针、信号探针和能够与信号探针进行特异性结合的荧光染料；

信号探针的序列为5'-TCCTATTGTGACTTTGGGTAGGGCGGGTTGGG-3'；

辅助探针的序列为5'-GCCCTACCCGGGTGTATATTCTG-3'。