[发明专利]一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定方法和装置

权利要求书

1.一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定方法，包括以下步骤：

将植酸酶发酵液进行稀释，得到植酸酶发酵液稀释液；

将所述植酸酶发酵液稀释液、乙酸缓冲液和植酸钠溶液混合，将所得体系进行酶解反应，当所述酶解反应的时间为T时，向所得体系中加入三氯乙酸-乙酸缓冲液终止所述酶解反应，得到待测样品液；

以磺基水杨酸溶液-乙酸缓冲液为工作液，采用三氯化铁溶液对所述待测样品液进行滴定，至工作液指示反应终点时结束滴定，根据预定的植酸钠消耗的物质的量与滴定时间的线性标准曲线，得到植酸钠消耗的物质的量为S_x；

利用E＝(S₀-S_x)×d/T，计算得到植酸酶发酵液中植酸酶活性；

其中，E为植酸酶发酵液中植酸酶活性，S₀为酶解反应前体系中植酸钠的物质的量，S_x为滴定完成后的植酸钠消耗的物质的量，T为酶解反应的时间，d为植酸酶发酵液的稀释倍数。

2.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述酶解反应的时间为28～32min，酶解反应的温度为35～39℃。

3.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述植酸钠溶液与植酸酶发酵液稀释液的体积比为(1.8～2.2)：1。

4.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述三氯化铁溶液的浓度为0.018～0.022mol/L。

5.根据权利要求1～4任一项所述的测定方法，其特征在于，所述线性标准曲线的获得方法，包括以下步骤：

将植酸钠与水混合，得到系列浓度植酸钠标准溶液；

以磺基水杨酸溶液-乙酸缓冲液为工作液，采用三氯化铁溶液分别对所述植酸钠标准溶液进行滴定，至工作液指示反应终点时结束滴定，得到以植酸钠消耗的物质的量为纵坐标，以滴定时间为横坐标的线性标准曲线。

6.如权利要求5所述的测定方法，其特征在于，所述植酸钠标准溶液的浓度为0～5.0mmol/L。

7.一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置，包括计算机控制系统、滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶，其中，所述计算机控制系统分别与所述滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶通信连接，所述计算机控制系统对所述滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶的工作状态进行控制和调节；所述计算机控制系统对测定结果进行自动输出；所述光电检测装置包括光源和光电接收转换器；所述滴定池分别与滴定液瓶和工作液瓶连通；所述滴定池设置在所述光源和光电接收转换器之间，所述光电检测装置用于检测滴定池中颜色的变化。

8.如权利要求7所述的测定装置，其特征在于，所述滴定池与所述滴定液瓶、滴定池与工作液瓶之间分别设置有液体泵，所述计算机控制系统与所述液体泵通信连接，所述计算机控制系统通过对所述液体泵的工作状态进行控制和调节实现对所述滴定液瓶和工作液瓶工作状态的控制和调节。

9.如权利要求7所述的测定装置，其特征在于，还包括废液瓶和清洗液瓶，所述清洗液瓶和废液瓶分别与滴定池连通，所述滴定池与所述废液瓶和清洗液瓶之间分别设置有液体泵，所述计算机控制系统与所述液体泵通信连接，所述计算机控制系统通过对所述液体泵的工作状态进行控制和调节实现对所述滴定液瓶和工作液瓶工作状态的控制和调节。