[发明专利]一种检测有机磷农药多残留的免疫分析试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种基于荧光寡核苷酸信号放大技术检测有机磷农药多残留的免疫分析试剂盒，其特征在于，包括如下组成：包被有抗原的黑色酶标板、胶体金探针溶液、洗液和二硫苏糖醇溶液；

所述抗原包括三唑磷、对硫磷和毒死蜱；

所述胶体金探针为表面修饰有生物条形码和以下任意一种特异性单克隆抗体的金纳米粒子；所述特异性单克隆抗体包括三唑磷抗体、对硫磷抗体和毒死蜱抗体；所述金纳米粒子表面修饰生物条形码的数量为130～170条；

所述生物条形码标记有荧光基团；修饰有相同单克隆抗体的金纳米粒子表面对应修饰的生物条形码被同一颜色的荧光基团标记；修饰有不同单克隆抗体的金纳米粒子表面对应修饰的生物条形码被不同颜色的荧光基团标记。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述三唑磷的包被浓度为0.12～0.2mg/L，所述对硫磷的包被浓度为0.56～0.7mg/L，所述毒死蜱的包被浓度为0.8～0.94mg/L。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述胶体金探针溶液的摩尔浓度为8～10nmol/L；所述金纳米粒子的粒径为12～14nm。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述洗液含有体积分数0.1～1％吐温-20的0.005～0.015mol/L的PBS缓冲液。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述二硫苏糖醇溶液的摩尔浓度为18～22nmol/L。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光基团包括6-FAM、CY-3和TEXASRed。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括农药标准品。

8.根据权利要求1～7任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述胶体金探针的制备方法包括胶体金的合成、生物条形码的活化、特异性单抗的标记和生物条形码的标记。

9.权利要求1～8任一项所述试剂盒在检测有机磷农药多残留中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述检测有机磷农药多残留的方法包括如下步骤：

(1)向包被有抗原的黑色酶标板中加入待测样品和胶体金探针溶液，37℃孵育0.5～2h，用洗液洗板；

(2)向所述步骤(1)洗板后的酶标板孔中加入二硫苏糖醇溶液，37℃振荡反应1～3h，检测不同颜色荧光基团的荧光信号，分别测定荧光值；

(3)将测定的荧光值分别代入相应荧光信号的标准曲线形成的标准方程式中，计算得到不同类型有机磷农药残留的量。