[发明专利]一种磷脂-聚乙二醇-狂犬病毒衍生肽聚合物，其制备方法及应用

说明书

一种磷脂‑聚乙二醇‑狂犬病毒衍生肽聚合物，其制备方法及应用。本发明涉及实现血脑屏障穿透功能的磷脂‑聚乙二醇‑狂犬病毒衍生肽(DSPE‑PEG‑RVG‑15),通过RVG‑15与乙酰胆碱受体的相互作用介导入脑，可以作为药物递送载体，用于构建释药系统，实现载药入脑的目的。本发明通过自组装法构建了DSPE‑PEG‑RVG‑15/DOX纳米释药系统，制备方法较简单，经济，所得的纳米粒粒径较小，较均一，颗粒圆整，跨血脑屏障效率较高，毒性较小，具有较好的发展前景。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种多肽修饰的脑靶向化药递送系统及其应用，具体涉及一种对血脑屏障高穿透性狂犬病毒糖蛋白(Rabies virus glycoprotein,RVG)衍生肽与磷脂-聚乙二醇连接构成的脑靶向递送系统及其应用。

背景技术

脑是人体重要器官，是生命机能的调节器。脑部疾病已严重危害人类健康，脑部疾病种类繁多，发病机制复杂，且由于血脑屏障(blood brain barrier,BBB) 的存在，治疗难度较大。血脑屏障是指脑毛细血管壁与神经胶质细胞形成的血浆与脑细胞之间的屏障和由脉络丛形成的血浆和脑脊液之间的屏障，这些屏障能够阻止某些物质由血液进入脑组织。这种结构可使脑组织少受甚至不受循环血液中有害物质的损害，从而保持脑组织内环境的基本稳定，对维持中枢神经系统正常生理状态具有重要的生物学意义。但是BBB同时也可拒绝大部分的药物入脑，使得药物难以到达脑部病灶。为克服跨BBB难题，实现脑部疾病的有效治疗，目前已有报道的方法包括：脑部注射给药(如颅腔内给药)、动脉注射高渗物质暂时打开BBB、将水溶性药物制成脂溶性前药、主动靶向分子介导跨过BBB等。

二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG)，作为科学研究中广泛使用的一种双亲性磷脂-PEG共轭物，含有亲水性PEG和疏水性DSPE。如此独特的 DSPE-PEG分子，可以作为辅助型材料用来表面功能化一系列的药物传递系统如基于磷脂的纳米粒子、基于聚合物的纳米粒子、基于无机材料的纳米粒子等。PEG 的引入可以降低免疫原性和抗原性，并可达到长循环的功能；DSPE用于作为纳米粒子的疏水性结构以便有效装载药物。

嵌段聚合物胶束是药剂学纳米体系研究的重要领域之一，近年来发展迅速。利用两亲型聚合物通过自组装方式形成纳米胶束，药物可以加载于内部疏水核心，也可加载于外部亲水层。

阿霉素(DOX)，具有较强的抗肿瘤作用，可以直接作用于DNA，插入DNA 的双螺旋链，使后者解开，改变DNA的模板性质，抑制DNA聚合酶从而既抑制 DNA合成，也抑制RNA合成。此外，阿霉素具形成超氧基自由基的功能，并有特殊破坏细胞膜结构和功能的作用，是一款经典的广谱抗癌药物。阿霉素的多种制剂临床应用于治疗急性白血病、恶性淋巴瘤、乳腺癌、骨肉瘤及软组织肉瘤、肺癌等多种恶性肿瘤。但因其不能透过血脑屏障，其对脑胶质瘤的治疗作用不大。

主动靶向分子主要是能特异性地结合BBB上的受体或转运体一类分子。采用主动靶向分子修饰的给药系统可模拟BBB上的受体或转运体介导相应内源性的配体或底物跨过BBB转运的过程，此方法能够极大程度地降低脑部损伤，并且可以增加药物的脑部摄取效率。

狂犬病毒糖蛋白衍生的由29个氨基酸构成的多肽RVG-29是一种主动靶向分子，可特异性的与血脑屏障上的乙酰胆碱受体进行特异性结合，介导药物跨过血脑屏障，但由于29个氨基酸结构过长，对所形成的纳米颗粒粒径有一定影响。本课题组前期对狂犬病毒糖蛋白衍生肽结构及靶向效率进行考察，筛选出由15个氨基酸构成，脑靶向效率与RVG-29相当的狂犬病毒糖蛋白衍生肽片段。本课题组前期构建了以RVG-15为靶头修饰的脑靶向载体递送核酸入脑，用以治疗脑胶质瘤，体外实验与体内实验均得到较好效果(黄伟.一种狂犬病毒糖蛋白衍生肽修饰的脑靶向核酸递送载体及其应用：中国，201710277357.8[P].2017-4-25.)。本发明将该狂犬病毒糖蛋白衍生肽RVG-15修饰聚乙二醇-磷脂，构建PE-PEG-RVG-15载药系统，可包载递送传统化药入脑，对那些体外有效但体内难以跨越BBB的药物入脑治疗脑部疾病提供了一个种新方法。

发明内容