[发明专利]一株产灰黄霉素的菌株及其应用

说明书

本发明公开了一株产灰黄霉素的菌株及其应用。本发明提供了灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO：M 2018187。利用本发明所提供的灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816生产灰黄霉素，采用不用乳糖和玉米浆的原料路线和流加补氯发酵新工艺，可大幅度提高灰黄霉素的发酵效价，降低生产成本，为开发作为抗真菌生物农药——松刚霉素提供可靠的原料来源。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及一株产灰黄霉素的菌株及其应用。

背景技术

灰黄霉素作为一类医农两用的抗生素，最早为国外厂商开发的第一代抗皮肤真菌病药物，在20世纪60年代上市，曾被国际药学界誉为是对付真菌病的一大里程碑重大药物。随着生物技术及生物信息学的不断进步，灰黄霉素的应用范围也不断扩大，其中最为让人瞩目方面在抗癌药和农业的应用开发方面，其为灰黄霉素的市场拓展开辟了新途径。经过几十年的长足发展，我国现已成为灰黄霉素原料药的唯一生产国，总产能已扩大至1000吨左右。

灰黄霉素农用化使其作为生物农药成为可能，利用生物藕合技术，对灰黄霉素基团进行藕合修饰，使其具备更好的抗植物真菌病原的能力和水溶性，研制出新型抗真菌生物农药——松刚霉素，为进一步开拓灰黄霉素市场提供了广阔的空间。

目前国内采用液体深层发酵模式生产的灰黄霉素，其工业化大生产的发酵水平多年来都维持在25000μg/mL左右，糖素的转化率较低，而且在发酵周期超过240h，发酵过程中存在一段明显的停滞期，发酵效率来说还是偏低，致使发酵成本处于高位，农业推广应用受到限制。如何进一步获得高产灰黄霉素的菌株及开发高效的灰黄霉素发酵工艺，对于灰黄霉素的应用及以灰黄霉素为主效成分的生物农药——松刚霉素的开发具有重大意义。

发明内容

为了有效解决上述技术问题，本发明的目的是提供一株高产灰黄霉素的菌株。

第一方面，本发明要求保护一株灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816。

本发明所提供的灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO：M 2018187。

该菌株为自行从土壤中分离获得的产灰黄霉素的出发菌株F3215(CCTCC NO：M2018188)通过紫外线加氯化锂诱变获得的优良变株。该优良菌株能够高效积累灰黄霉素，而且发酵周期较现有发酵菌种明显缩短，发酵原料来源广泛，而且无氯灰黄霉素组分含量少。

第二方面，本发明要求保护一种菌剂。

本发明所提供的菌剂的活性成分为前文所述的灰黄青霉(Penicilliumgriseofulvum)FH1816。

第三方面，本发明要求保护前文所述的灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816或所述菌剂在生产灰黄霉素中的应用。

第四方面，本发明要求保护前文所述的灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816或所述菌剂在制备松刚霉素中的应用。

实验证明，利用本发明所提供的灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816生产灰黄霉素，采用不用乳糖和玉米浆的原料路线和流加补氯发酵新工艺，可大幅度提高灰黄霉素的发酵效价，降低生产成本，为开发作为抗真菌生物农药——松刚霉素提供可靠的原料来源。经发酵罐培养，本发明所提供的灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816的生物量，菌丝体湿重达到29.5％，较原始菌株F3215的生物量提高120％；灰黄霉素效价达到30751μg/mL，较菌株F3215的灰黄霉素效价提高55倍；脱氯灰黄霉素占灰黄霉素比例为0.17％，较菌株F3215的脱氯灰黄霉素含量低33.5％。