[发明专利]中空纤维膜微萃取结合在线衍生化-气相色谱法测定防腐剂的方法

说明书

本发明提供了一种中空纤维膜微萃取结合在线衍生化‑气相色谱法测定苯甲酸、山梨酸的方法，本发明方法前处理提取步骤少、富集系数高、成本低、有机溶剂用量少，具有很好的样品净化能力，同时也具备了较强的抗基体干扰能力；另外中空纤维成本低，一次性使用，避免了样品间的交叉污染。

(一)技术领域

本发明涉及一种防腐剂的测定方法，具体涉及一种中空纤维膜微萃取结合在线衍生化-气相色谱法测定食品中苯甲酸、山梨酸防腐剂含量的方法。

(二)背景技术

苯甲酸和山梨酸是常见的防腐剂，具有抑制细菌生长和繁殖的作用，广泛应用于食品行业，然而食用含有过量苯甲酸和山梨酸的食品会影响人体对维生素和钙的吸收，加重人的肝脏负担，并引起毒素性反应或诱发癌症。FAO与WHO详细规定了不同食品中苯甲酸和山梨酸的使用范围与用量，我国也对防腐剂的使用有着严格规定，国家规定食品添加剂使用卫生标准(GB2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》)规定了各类食品中苯甲酸与山梨酸的使用限量。一些国标检测方法也已颁布，用于监控食品中的苯甲酸和山梨酸的不合理使用。因此，定性和定量检测食品防腐剂对食品安全是非常重要的。

已报道文献的前处理常采用液-液萃取、超声波辅助溶剂萃取、加速溶剂萃取。大部分前处理方法存在提取步骤繁琐、耗时长、成本高、有机溶剂耗量大等缺陷。由于饮品类型繁多，其中含有的多种添加剂以及未知的复杂基质均干扰饮品中防腐剂的检测，因此建立提取步骤少、成本低、有机溶剂用量少的样品前处理过程至关重要。中空纤维固相微萃取技术是一种集采样、萃取、浓缩于一体，有机溶剂用量少的环境友好型样品预处理技术。由于纤维壁孔较小，能阻碍样品中的大分子物质进入膜内，因此该方法具有很好的样品净化能力，同时也具备了较强的抗基体干扰能力；另外中空纤维成本低，一次性使用，避免了样品间的交叉污染。

(三)发明内容

本发明提供了一种前处理简单、富集系数高、成本低的中空纤维膜微萃取结合在线衍生化-气相色谱法测定山梨酸、苯甲酸的方法。

本发明的技术方案如下：

一种中空纤维膜微萃取结合在线衍生化-气相色谱法测定苯甲酸、山梨酸的方法，所述方法包括如下步骤：

(1)样品前处理

取样品(例如饮品)，用NaCl和HCl的水溶液稀释，得到待测溶液，将所得待测溶液置于顶空瓶中，放入中空纤维膜，在温度30℃、搅拌速率200rpm的条件下萃取40min，取出中空纤维膜，待用；

所述待测溶液中，NaCl的浓度为0.05mol/L，HCl的浓度为0.5mol/L；

所述中空纤维膜为聚砜膜，膜外径0.978mm、内径0.800mm、孔径0.2mm，可通过常规途径商购获得；

所述中空纤维膜在使用前剪成长度1cm的小段，并在乙醇中浸泡1h，自然晾干后保存于玻璃瓶内备用；

(2)样品检测

将步骤(1)中准备好的中空纤维膜置于闪蒸气相色谱仪进样口上方裂解器的样品杯中，并加入衍生化试剂TMSH(三甲基氢氧化硫)，待裂解器温度达到300℃时，按下进样按钮，样品杯掉入裂解炉的炉心，进行闪蒸气相色谱分析；

所述闪蒸气相色谱分析的条件为：

色谱柱：DB-5(Agilent Labs,30m×0.25mmi.d.×0.25μm,5％苯基甲基聚硅氧烷)；柱温：初温50℃，以10℃/min速率升到300℃，保持5min；气化室温度为300℃；检测器温度为320℃；裂解器温度：裂解炉温度和色谱柱进样口温度均为300℃；分流比30：1；载气N₂；柱流量1.0mL/min；

(3)建立标准曲线