[发明专利]从光合细菌中逐级提取多种高价值物质的方法

权利要求书

1.一种从光合细菌中逐级提取辅酶Q10、类胡萝卜素、菌绿素、5-ALA和蛋白质的方法，包括如下步骤：

1）将光合细菌菌液离心后，弃去上清液，收集菌体沉淀，破碎细胞壁；

2）将步骤1）破碎细胞壁后的体系进行辅酶Q10的提取，收集所得上清液，得到辅酶Q10；

3）收集步骤2）提取所得体系的下层菌液，进行类胡萝卜素和菌绿素的提取，收集所得上清液，得到类胡萝卜素和菌绿素；

4）收集步骤3）提取所得体系的下层菌液，进行5-ALA的提取；

5）收集步骤4）提取所得体系的下层菌液，进行蛋白质的提取。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1）离心步骤中，离心转速为6000-10000r/min；时间为5-15分钟；

所述破碎细胞壁步骤中，破碎方法包括：将所述菌体沉淀与溶剂混合后置于超声波细胞粉碎机中超声。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所用超声波细胞粉碎机为宁波新芝超声波细胞粉碎机JY92-IIDN。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述溶剂为丙酮；

所述溶剂的用量为70～73ml/g DCW；

所述超声步骤中，超声功率为300～600W；超声温度为10～25℃；所述超声为每超声工作2s间隔1s；超声时间为5～20min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2）中，提取方法为在摇床中振荡。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述摇床温度为20-40℃；振荡时间为20～40min；转速为85～135r/min。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤3）中，提取方法为在提取溶剂中静置。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述步骤3）中，所用提取溶剂为丙酮和甲醇；所用提取溶剂中，丙酮和甲醇的体积比为6-8：2；所述下层菌液与提取溶剂的体积比为1-3:1；提取温度为20-40℃；静置时间为1-6小时。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述步骤3）中，所用提取溶剂中，丙酮和甲醇的体积比为7:2；所述下层菌液与提取溶剂的体积比为2:1。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤4）中，提取方法包括如下步骤：

向步骤3）提取所得体系的下层菌液中加入5-ALA提取溶剂后混匀，水浴加热冷却至室温后离心，收集上清液，完成所述5-ALA的提取。

11. 根据权利要求10所述的方法， 其特征在于：所述5-ALA提取溶剂由乙酸钠缓冲液和乙酰丙酮组成。

12. 根据权利要求11所述的方法，其特征在于：所述乙酸钠缓冲液的浓度为1-2mol/L；pH 值为4-5；

所述乙酸钠缓冲液和乙酰丙酮的体积比为0.8-1.5：0.25-1；所述菌液与乙酸钠缓冲液的体积比为9-11：1；

所述水浴加热步骤中，温度为90～100℃；时间为20～40min；

所述离心步骤中，离心转速为6000-10000r/min；时间为3～6分钟。

13.根据权利要求1-12中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤5）中，提取方法为盐析法。

14.一种从光合细菌中逐级提取辅酶Q10、类胡萝卜素和菌绿素的方法，包括权利要求1-13中任一所述方法的步骤1）至步骤3）。