[发明专利]表达CD40抗体的慢病毒载体、CAR-T细胞的构建方法及应用在审
| 申请号： | 201810813670.3 | 申请日： | 2018-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN108913721A | 公开（公告）日： | 2018-11-30 |
| 发明（设计）人： | 王维;韩江萌;刘振云;程丰伟;徐华栋 | 申请（专利权）人： | 安徽古一生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/66;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 合肥市浩智运专利代理事务所(普通合伙) 34124 | 代理人： | 王亚洲 |
| 地址： | 238000 安徽省合肥*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 慢病毒载体 特异性抗原 实体瘤 靶点 构建 肿瘤 慢病毒表达载体 肿瘤免疫治疗 巨噬细胞 杀伤能力 抗原 增殖 应用 细胞 携带 恶化 保证 | ||
1.一种表达CD40抗体的慢病毒载体，其特征在于：所述载体为携带实体瘤特异性抗原靶点的表达CD40抗体的慢病毒载体。
2.根据权利要求1所述的表达CD40抗体的慢病毒载体，其特征在于：所述载体为CAR基因的pCDH慢病毒载体。
3.根据权利要求1所述的表达CD40抗体的慢病毒载体，其特征在于：所述实体瘤特异性抗原靶点具体为：表皮生长因子受体3型突变体EGFRvⅢ、EpCAM上皮细胞粘附分子、人表皮生长因子受体2HER2、白介素13受体α2IL13RA、癌胚抗原CEA、间皮素MSLN、成纤维细胞激活蛋白FAP、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3GPC3、卵泡刺激素受体FSHR、人前列腺特异性膜抗原PSMA、神经节苷脂GD2。
4.一种表达CD40抗体的慢病毒载体的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)携带实体瘤特异性抗原靶点的CAR基因的慢病毒表达载体的构建；
(2)携带CD40抗体的实体瘤特异性抗原靶点的CAR基因的慢病毒载体的包装。
5.根据权利要求4所述的表达CD40抗体的慢病毒载体的构建方法，其特征在于：所述步骤(2)中实体瘤特异性抗原靶点具体为：表皮生长因子受体3型突变体EGFRvⅢ、EpCAM上皮细胞粘附分子、人表皮生长因子受体2HER2、白介素13受体α2IL13RA、癌胚抗原CEA、间皮素MSLN、成纤维细胞激活蛋白FAP、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3GPC3、卵泡刺激素受体FSHR、人前列腺特异性膜抗原PSMA、神经节苷脂GD2。
6.根据权利要求1所述的表达CD40抗体的慢病毒载体的应用，其特征在于：所述载体在由巨噬细胞引起的肿瘤快速增长综合症药物中的应用。
7.一种表达CD40抗体的CAR-T细胞，其特征在于：所述CAR-T细胞是由所述携带实体瘤特异性抗原靶点的表达CD40抗体的CAR基因的慢病毒载体制备而成。
8.根据权利要求7所述的表达CD40抗体的CAR-T细胞的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)携带实体瘤特异性抗原靶点的CAR基因的慢病毒表达载体的构建；
(2)携带实体瘤特异性抗原靶点的表达CD40抗体的CAR基因的慢病毒的包装；
(3)携带实体瘤特异性抗原靶点的表达CD40抗体的CAR基因的慢病毒表达载体感染T细胞。
9.根据权利要求8所述的表达CD40抗体的CAR-T细胞的构建方法，其特征在于：所述实体瘤特异性抗原靶点具体为：表皮生长因子受体3型突变体EGFRvⅢ、EpCAM上皮细胞粘附分子、人表皮生长因子受体2HER2、白介素13受体α2IL13RA、癌胚抗原CEA、间皮素MSLN、成纤维细胞激活蛋白FAP、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3GPC3、卵泡刺激素受体FSHR、人前列腺特异性膜抗原PSMA、神经节苷脂GD2。
10.根据权利要求7所述的表达CD40抗体的CAR-T细胞的应用，其特征在于：所述CAR-T细胞在治疗实体肿瘤药物中的应用。
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