[发明专利]降血糖的低极性罗汉果皂苷群及其制备方法

说明书

一种降血糖的低极性罗汉果皂苷群及其制备方法，首先以罗汉果酸水解得到皂苷粗提物，然后采用大孔树脂和聚酰胺柱色谱进一步纯化得到低极性罗汉果皂苷群。本发明针对罗汉果降糖的有效部位—罗汉果低极性皂苷群，采用酸水解方法定向制备低极性罗汉果皂苷，得到的有效部位有明显降低II型糖尿病血糖的效果。

技术领域

本发明涉及的是一种医疗药物制备领域的技术，具体是一种降血糖的低极性罗汉果皂苷群及其制备方法。

背景技术

罗汉果为葫芦科植物罗汉果[Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffery ex Luet Z.Y.Zhang]的干燥成熟果实，其皂苷提取物具有显著降低糖尿病模型大鼠、小鼠血糖的作用。鲜罗汉果皂苷提取物对正常小鼠餐后血糖生成有明显的抑制作用。

但最新研究表明，罗汉果三萜皂苷经糖尿病人源肠道菌代谢发生脱糖反应，代谢成赛门苷Ⅰ、罗汉果苷ⅣE、罗汉果苷Ⅱ、罗汉果苷ⅠA₁和罗汉果苷ⅠE₁等产物，以低于4个糖基的低极性三萜皂苷类成分为主。罗汉果苷V在糖尿病大鼠体内亦代谢产生1-3个糖基的低极性三萜皂苷类成分。因此，对1-3个糖基的低极性三萜皂苷类成分进行制备及活性研究具有重要意义。然而，含1～3个糖基的皂苷在罗汉果药材中含量极低，仅约为罗汉果苷V含量的8％，难以规模制备。

发明内容

本发明针对现有技术存在的上述不足，提出一种降血糖的低极性罗汉果皂苷群及其制备方法，针对罗汉果降糖的有效部位—罗汉果低极性皂苷群，采用酸水解方法定向制备低极性罗汉果皂苷，得到的有效部位有明显降低II型糖尿病血糖的效果。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明涉及一种低极性罗汉果皂苷群的工业制备方法，首先以罗汉果酸水解得到皂苷粗提物，然后采用大孔树脂和聚酰胺综合吸附进一步纯化得到低极性罗汉果皂苷群。

所述的酸水解，以干燥成熟罗汉果为原料，经浓缩得到干浸膏后通过硫酸和/或盐酸水解制备皂苷粗提物。

所述的干浸膏，通过选取罗汉果经破碎后加入乙醇，经加热回流后过滤浓缩得到。

所述的通过硫酸和/或盐酸水解是指：将干浸膏稀释后加入硫酸和/或盐酸并加热孵育，然后将水解上清通过有机试剂萃取后浓缩得到。

所述的有机试剂包括乙酸乙酯和正丁醇。

所述的综合吸附是指：取AB-8大孔吸附树脂和聚酰胺用乙醇浸泡后，装柱，用蒸馏水洗至无醇味，再经酸碱冲洗后用蒸馏水冲洗至中性；然后经水溶解后取上清溶液，上样于预处理好的大孔树脂柱吸附后，分别用水和乙醇除去水溶性杂质后，再用乙醇进行5～27个柱体积洗脱，得到含低极性罗汉果皂苷群的乙醇洗脱液，浓缩、低温减压干燥，得干燥粉末；最后将干燥粉末以干法上样于预处理好的聚酰胺柱，用水除去水溶性杂质，再用乙醇进行5个柱体积洗脱，得到含罗汉果低极性皂苷群的乙醇洗脱液，将其浓缩，低温减压干燥，得低极性罗汉果皂苷群。

所述的低极性罗汉果皂苷群，采用UPLC测定低极性罗汉果皂苷群的含量，计算总含量。UPLC检测条件为：采用C18色谱柱，以水(A)-乙腈(B)梯度洗脱，梯度洗脱程序为：0～30min 20％～50％B，30～32min 50％～20％B，20％B 32～33min，检测波长为205nm，流速为0.6mL/min。

本发明涉及上述方法制备得到的低极性罗汉果皂苷群，包含罗汉果苷Ⅲ、罗汉果苷ⅢA₁、罗汉果苷ⅡE、罗汉果苷ⅡA₁和罗汉果苷ⅠA₁的混合物，其中：罗汉果苷Ⅲ、罗汉果苷ⅢA₁、罗汉果苷ⅡE、罗汉果苷ⅡA₁和罗汉果苷ⅠA₁的含量分别为0.5％～5％、0.5％～5％、1％～20％、1％～20％、2％～40％，总含量大于60％。