[发明专利]垫柳的组织培养方法在审
| 申请号： | 201810809512.0 | 申请日： | 2018-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN108834898A | 公开（公告）日： | 2018-11-20 |
| 发明（设计）人： | 向楠;孙旭东;杨永平 | 申请（专利权）人： | 中国科学院昆明植物研究所 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 昆明协立知识产权代理事务所(普通合伙) 53108 | 代理人： | 旃习涵 |
| 地址： | 650201 *** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 组织培养 愈伤组织诱导培养基 生根培养基 诱导培养基 培养条件 丛生苗 外植体 枝条 嫩叶 腋芽 光照 | ||
1.一种垫柳的组织培养方法，该方法利用垫柳的带腋芽枝条、嫩叶片两种外植体进行组织培养，在2000lux光照强度，温度26℃下进行培养，愈伤组织诱导培养基为：MS+0.1mg/L6-BA+0.1mg/L NAA，丛生苗诱导培养基为：MS+3mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+0.05mg/L GA，生根培养基为：1/2MS+0.1mg/L NAA。
2.一种垫柳的组织培养方法，其特征在于该方法包括下述步骤：
(1)栽培：，取生长健壮、无病虫害的垫柳植株种植在温室中，待侧芽刚刚吐白萌动为止；
(2)外植体选择：用刀片取带腋芽的枝条1–2cm、叶片0.5cm×0.5cm作为外植体，用70％酒精消毒30s，用无菌水清洗3次，至超菌工作台无菌条件下，用20％次氯酸钠消毒15分钟，用无菌水冲洗5次，将外植体表面用经过灭菌处理的滤纸吸干；
(3)培育愈伤组织：将带腋芽的枝条和叶片接种于诱导愈伤组织的培养基上，外植体贴进培养基，培养基配方为：MS基本培养基+6-BA0.1-0.3mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L，30g/L的蔗糖，pH:5.8，8g/L琼脂，置于普通日光灯光源下，光照强度为2000Lux，每日光照时间为12小时，温度为25℃，培养15天后，诱导出绿色愈伤组织；
(4)丛生苗诱导：将绿色的愈伤组织进行继代培养，继代培养基为：MS基本培养基+6-BA1-3mg/L+NAA 0.3-0.5mg/L+0.05mg/L GA,30g/L的蔗糖，pH:5.8，8g/L琼脂，放入光照强度为2000lux光照下培养，温度为25℃，每日光照时间为12h，每两个星期继代1次；
(5)育苗生根：将丛生芽分离切成单株，对基部进行剪切，接入到生根培养基中，生根培养基为：1/2MS+0.1g/L NAA+1g/L活性炭，10g/L蔗糖，pH:5.8，置于普通日光灯源的环境下，光照强度为2000lux，每日光照时间为20小时，温度25℃，培养30天；
(6)炼苗：将试管苗开瓶保存2天后，取出试管苗洗净，移栽到土里。
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