[发明专利]用于检测大肠癌的生物标志物及其应用

说明书

本发明涉及诊断标志物，具体提供了用于检测大肠癌的生物标志物及其应用。本发明通过实验研究发现，妊娠相关血浆蛋白A(PAPPA)基因在结肠腺癌组织、结肠粘液腺癌组织、盲肠腺癌组织、乙状结肠直肠癌组织和直肠腺癌组织中的mRNA表达水平和健康对照之间存在显著差异；大肠癌病人血清中的PAPPA蛋白表达水平也显著高于正常人组。本发明首次提出了PAPPA与大肠癌之间的相关性，并通过实验验证了可利用的PAPPA对大肠癌进行诊断，具有操作简单、高特异性、高灵敏性的特点。

技术领域

本发明涉及诊断标志物，具体地说，涉及妊娠相关血浆蛋白A(PAPPA)在检测大肠癌中的应用。

背景技术

妊娠相关血浆蛋白A(PAPPA)最初是在孕妇血浆中发现的。在妊娠期间，PAPPA由胎盘合胞体滋养细胞产生并分泌到血清中，其水平在整个怀孕期间保持。循环中异常的PAPPA水平与胎儿疾病有关；例如，低PAPPA水平与胎儿唐氏综合征(21三体)、早产、低出生体重以及早孕期先兆子痫相关。相反，糖尿病肾病患者PAPPA水平升高。

PAPPA基因位于染色体9q33.1上并且编码1627个氨基酸的180kDa的蛋白质。PAPPA在骨形成，炎症和损伤反应(例如伤口愈合)中起重要作用。越来越多的证据表明PAPPA在所有正常组织中普遍表达，但除肾和骨细胞外，其水平非常低。

结直肠癌(colorectal cancer，CRC)是人类常见的消化系统恶性肿瘤，发病率居恶性肿瘤的第3位，起病隐匿，预后较差，大多患者就诊时已到中晚期，失去了最佳手术时机。因而，早发现早诊断是肿瘤获得有效治疗的关键。临床上结肠腺癌的诊断主要依赖于实验室检查如大便隐血(FOBT)试验、细胞学诊断、组织病理学检查、血清癌胚抗原(CEA)测定等，纤维结肠镜检查，影像学诊断如结肠气钡双重造影、CT扫描、MRI、超声切面显像诊断、核素诊断，肠镜是结肠腺癌诊断最可靠的方法，但具有侵入性、费用昂贵，患者依从性差；CT和超声检查不易发现较小病变，对结肠腺癌的早期诊断受到一定限制；CEA是临床广泛应用的血清标志物，其敏感性和特异性较低，主要用于结肠腺癌患者的治疗监测。

因此，开发可用作CRC患者诊断的特异性生物标志物，对患者的及时确诊和治疗都将具有重要且积极的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的用于检测大肠癌的生物标志物及其应用。

为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：

本发明首先提供一种用于检测大肠癌的生物标志物，所述生物标志物为妊娠相关血浆蛋白A(PAPPA)(NCBI登录号NM-002581.3)。

本发明通过实验研究发现，该妊娠相关血浆蛋白A(PAPPA)基因在结肠腺癌组织、结肠粘液腺癌组织、盲肠腺癌组织、乙状结肠直肠癌组织和直肠腺癌组织中的mRNA表达水平和健康对照之间存在显著差异；大肠癌病人血清中的PAPPA蛋白表达水平也显著高于正常人组。

基于上述研究成果，本发明还提供了用于检测所述生物标志物的引物对，所述引物对包括：

正向引物：5’-GAACGGTTCAACTTTGATGGTG-3’；

反向引物：5’-TATTGAGATGTGTTGATCCATCC-3’。

本领域技术人员应当理解，基于本发明的研究成果，用于检测本发明所述生物标志物的试剂均属于本发明的保护范围。

所述试剂含有特异性扩增PAPPA基因转录的mRNA的引物，例如本发明前文所述的引物对。

进一步地，本发明基于所述生物标志物与大肠癌的关联性，提供了所述试剂在制备大肠癌诊断试剂或试剂盒或其他产品中的应用。

可选地，用于诊断大肠癌的试剂盒，含有本发明前述试剂即可完成对所述生物标志物的检测。