[发明专利]用于体液样品中的粒子分析的自聚焦系统和方法

权利要求书

1.一种使体液样品中的粒子成像的方法，所述方法使用被配置用于几何流体聚焦的粒子分析系统，所述粒子包含在具有样品流体粘度的所述体液样品中，所述方法包括：

将所述体液样品注入流通池内的流路中以使得所述体液样品以流动料流宽度大于流动料流厚度的样品流动料流流动，所述样品流动料流流过流路尺寸的缩减段并横越成像轴；

通过使成像靶标成像来使图像捕获设备聚焦，所述图像捕获设备具有视野，并且在所述视野内，所述成像靶标具有相对于所述流通池固定的位置；以及

使用所述图像捕获设备在所述流动料流内采集适用于粒子表征和计数的所述粒子的聚焦图像，其中使用位移距离使所述图像捕获设备聚焦于所述样品流动料流，所述位移距离为沿着所述成像轴的所述成像靶标和所述样品流动料流之间的距离。

2.根据权利要求1所述的方法，还包括使鞘流体沿着所述流通池的所述流路流动，其中所述粒子分析系统可被配置用于组合式粘度和几何流体聚焦，其中所述鞘流体具有与所述样品流体粘度相差一个处于预定粘度差范围内的粘度差的鞘流体粘度，并且其中所述鞘流体与所述体液样品之间的所述粘度差，与流路尺寸的所述缩减段相结合，有效地在所述成像轴处流体聚焦所述样品流动料流，同时所述鞘流体中的粘度剂保持所述样品流动料流中的细胞的活力，使得所述细胞从所述样品流动料流延伸到流动的所述鞘流体中时所述细胞的结构和内容物完整。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述成像靶标位于观察孔窗口上，所述观察孔窗口设置在所述样品流动料流与所述图像捕获设备之间，或者

其中所述成像靶标位于照明窗口与观察孔窗口之间，或者

其中所述成像靶标包括用于将所述图像捕获设备的所述成像轴相对于所述样品流动料流定位的刻度，或者

其中所述成像靶标包括相对于所述成像轴配向的光圈，使得成像的所述粒子设置在由所述光圈限定的孔内，并且在自聚焦期间使所述光圈的一个或多个边缘部分成像。

4.根据权利要求1所述的方法，其中采集所述聚焦图像包括使用所述位移距离调节所述图像捕获设备与所述流通池之间的距离。

5.根据权利要求4所述的方法，其中调节所述图像捕获设备和所述流通池之间的所述距离包括移动所述图像捕获设备的部件，并且其中所述部件包括选自变焦镜头和包括所述图像捕获设备的组件的成员，或者

其中调节所述图像捕获设备和所述流通池之间的所述距离包括移动所述流通池，或者其中调节所述图像捕获设备与所述流通池之间的所述距离包括移动所述图像捕获设备的至少一个光学元件和所述流通池。

6.根据权利要求1所述的方法，还包括自聚焦，其中所述自聚焦步骤包括：

将测试流体样品注入鞘流体中以形成所述流通池内的测试样品流动料流；

使用所述图像捕获设备获得所述成像靶标的第一聚焦图像，所述聚焦的成像靶标和所述图像捕获设备限定第一焦距；

使用所述图像捕获设备获得所述测试样品流动料流的第二聚焦图像，所述聚焦的测试样品流动料流和所述图像捕获设备限定第二焦距；以及

通过计算所述第一焦距与所述第二焦距之间的差值来获得所述位移距离。

7.根据权利要求6所述的方法，还包括：

检测自聚焦再引发信号；

响应于所述自聚焦再引发信号而重复所述自聚焦和图像采集步骤。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述自聚焦再引发信号包括选自温度的变化、聚焦质量的降低、流逝的时间间隔或用户输入的成员。

9.根据权利要求1所述的方法，其中通过在所述流通池和所述图像捕获设备之间实施旋转调节将所述图像捕获设备聚焦于所述样品流动料流。

10.根据权利要求1所述的方法，所述体液样品包括：血清、脑脊髓液、胸膜液、腹膜液、唾液、尿液、精液、泪液、汗液、母乳、羊膜液、灌洗液、骨髓穿刺液、渗漏液、渗出液、经处理产生细胞悬液的活检样品、经处理产生细胞悬液的粪便样品、或细胞培养样品。