[发明专利]一种口蹄疫病毒免疫抗体评价及感染与免疫鉴别诊断二联试纸条有效
申请号: | 201810797244.5 | 申请日: | 2018-07-19 |
公开(公告)号: | CN108931644B | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
发明(设计)人: | 张改平;杨苏珍;孙亚宁;邢广旭;刘运超;王方雨;柴书军;邓瑞广 | 申请(专利权)人: | 河南省农业科学院 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/532;G01N33/58;G01N33/68 |
代理公司: | 郑州市华翔专利代理事务所(普通合伙) 41122 | 代理人: | 张爱军;徐文婷 |
地址: | 450002 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 口蹄疫病毒 免疫 抗体 评价 感染 鉴别 诊断 二联 试纸 | ||
1.一种口蹄疫病毒免疫抗体评价及感染与免疫鉴别诊断二联试纸条,其特征在于,试纸条包括样品垫、金标垫、吸收垫、底板、检测线和对照线,检测线和对照线印制在硝酸纤维素膜垫;所述检测线包括利用口蹄疫病毒VP1表位多肽人工抗原印制的检测线1,和利用口蹄疫病毒非结构蛋白表位多肽人工抗原印制的检测线2;
所述非结构蛋白表位多肽人工抗原为人工合成口蹄疫病毒非结构蛋白2B上第1096~1106位氨基酸RTPEDLERAEK,2C上第1414~1425位氨基酸HEKVSSHPIFKQ,及3B上第1602~1613位氨基酸GPYAGPMERQKP,并在其-NH4端加入一个半胱氨酸,再偶联载体蛋白形成的人工抗原;
采用口蹄疫病毒非结构蛋白2B上第1096~1106位氨基酸多肽制备的人工抗原,2C上第1414~1425位氨基酸多肽制备的人工抗原,3B上第1602~1613位氨基酸多肽制备的人工抗原,按质量比1:1:1混合;
对所述金标垫进行预处理,将处理液喷涂在纤维垫上,干燥,得到预处理的金标垫;
处理液由以下原料组成:BSA 5%,PVP-10 0.1%,Triton X-100 0.1%,余量为0.02mol/L的Na2B4O7·10H2O溶液。
2.根据权利要求1所述的试纸条,其特征在于,VP1表位多肽人工抗原为人工合成口蹄疫病毒VP1上第142~158位氨基酸多肽,并偶联载体蛋白形成的人工抗原;口蹄疫病毒VP1上第142~158位氨基酸多肽为口蹄疫病毒O/GX/09-7毒株VP1上第142~158位氨基酸序列NNVRGDLQVLAQKAERA;口蹄疫病毒O/HN/CHA/93毒株VP1上第142~158位氨基酸序列SNVRGDLQVLAQKAERA;口蹄疫病毒O/TAW/97毒株VP1上第142~158位氨基酸序列NNVRGDLQVLAQKAERT;口蹄疫病毒O/MYA/98毒株VP1上第142~158位氨基酸序列TNVRGDLQVLAQKAARP中至少一种。
3.根据权利要求2所述的试纸条,其特征在于,口蹄疫病毒O/GX/09-7毒株、O/HN/CHA/93毒株、O/TAW/97毒株、O/MYA/98毒株VP1上第142~158位氨基酸多肽按质量比1:1:1:1混合。
4.根据权利要求1所述的试纸条,其特征在于,还包括利用抗待检动物物种的二抗IgG印制的对照线。
5.根据权利要求1所述的试纸条,其特征在于,喷涂方法为:沿纤维垫长度方向的中心喷涂处理液,且喷涂后纤维垫上的处理液两侧边缘线与纤维垫对应侧的侧沿之间均存在间隙。
6.根据权利要求1所述的试纸条,其特征在于,干燥的条件为:37-42℃,10-70min。
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