[发明专利]一种聚集诱导发光/表面等离子体色度分析双模式核酸检测方法有效
| 申请号: | 201810783689.8 | 申请日: | 2018-07-17 |
| 公开(公告)号: | CN108949919B | 公开(公告)日: | 2021-07-20 |
| 发明(设计)人: | 唐本忠;沈建磊;秦安军;张忆茹 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12Q1/6886;C12Q1/04;C12Q1/6841 |
| 代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 罗啸秋 |
| 地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 聚集 诱导 发光 表面 等离子体 色度 分析 双模 核酸 检测 方法 | ||
1.一种非诊断目的聚集诱导发光/表面等离子体色度分析双模式核酸检测方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)通过杂交链式反应对目标核酸序列进行信号放大,超滤除去未反应的短片段核酸,得到杂交链式反应产物;
(2)将水溶性聚集诱导发光分子与不同浓度的步骤(1)的杂交链式反应产物进行混合,得到吸附有聚集诱导发光分子的杂交链式反应产物,通过测量荧光强度绘制核酸浓度的标准曲线,实现核酸定量分析;
(3)将巯基DNA修饰的金纳米粒子加入到步骤(2)中吸附有聚集诱导发光分子的杂交链式反应产物中,观察溶液的颜色变化,实现核酸定性分析;
步骤(3)中所述巯基DNA修饰的金纳米粒子的尺寸为5~100nm,表面修饰的DNA数目为10~10000条,每条DNA的碱基个数为5~100个;金纳米粒子与DNA的摩尔浓度比为1:100;
所述的水溶性聚集诱导发光分子具有如下式(II)所示的结构式:
(II)。
2.根据权利要求1所述的一种聚集诱导发光/表面等离子体色度分析双模式核酸检测方法,其特征在于:步骤(1)中所述超滤是指用尺寸为3~100kDa的超滤管进行超滤,超滤次数为1~5次,每次超滤结束后,通过超声处理20s~10min,使粘附在管壁上的核酸充分脱落。
3.根据权利要求1所述的一种聚集诱导发光/表面等离子体色度分析双模式核酸检测方法,其特征在于:步骤(3)中所述巯基DNA修饰的金纳米粒子加入的浓度以金纳米粒子计算为1~50nM。
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