[发明专利]一种治疗阿尔茨海默症的血浆蛋白分离物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种血浆蛋白分离物在制备改善或/和治疗阿尔茨海默症的药物中的应用，其特征在于：所述血浆蛋白分离物包括：α、β球蛋白，铜蓝蛋白，运铁蛋白，结合珠蛋白以及白蛋白；

所述血浆蛋白分离物的制备方法依次包括：从血液中分离血浆步骤，对血浆进行冷沉淀去除步骤，对所述冷沉淀去除步骤得到的上清液进行第一次低温乙醇沉淀的步骤，对所述第一次低温乙醇沉淀步骤得到的上清液进行第二次低温乙醇沉淀的步骤，对所述第二次低温乙醇沉淀步骤得到的上清液进行第三次低温乙醇沉淀的步骤，对所述第三次低温乙醇沉淀步骤得到的上清液进行第四次低温乙醇沉淀的步骤，取所述第四次低温乙醇沉淀后得到的沉淀物作为所述血浆蛋白分离物；

所述第一次低温乙醇沉淀步骤中，向所述冷沉淀去除步骤得到的上清液中加入乙醇溶液、pH调节剂，形成第一次低温乙醇沉淀体系，在所述第一次低温乙醇沉淀体系中，乙醇体积百分含量为5-10％，温度为0至-5℃，蛋白浓度为3-10g/dL，离子强度为0.10-0.20mol/kg，pH值为7.1-7.3；然后将该体系于0至-5℃条件下搅拌0.5-2h，随后进行分离处理，得到第一分离组分沉淀物和第一分离组分上清液；

所述第二次低温乙醇沉淀步骤中，向所述第一分离组分上清液中加入乙醇溶液、pH调节剂，形成第二次低温乙醇沉淀体系，在所述第二次低温乙醇沉淀体系中，乙醇体积百分含量为22-28％，温度为0至-10℃，蛋白浓度为1-5g/dL，离子强度为0.05-0.20mol/kg，pH值为6.7-7.0；再将该体系于0至-10℃条件下搅拌3-8h，随后进行分离处理，得到第二分离组分沉淀物和第二分离组分上清液；

所述第三次低温乙醇沉淀步骤中，向所述第二分离组分上清液中加入乙醇溶液、pH调节剂，形成第三次低温乙醇沉淀体系，在所述第三次低温乙醇沉淀体系中，乙醇体积百分含量为15-20％，温度为0至-10℃，蛋白浓度为1.0-2.0g/dL，离子强度为0.05-0.20mol/kg，pH值为5.0-5.4；再将该体系于0至-10℃条件下搅拌0.5-2.0h，静置大于等于6h，随后进行分离处理，得到第三分离组分沉淀物和第三分离组分上清液；

所述第四次低温乙醇沉淀步骤中，向所述第三分离组分上清液中加入乙醇溶液、pH调节剂，形成第四次低温乙醇沉淀体系，在所述第四次低温乙醇沉淀体系中，体系的乙醇体积百分含量为35-45％，温度为0至-10℃，蛋白浓度为0.05-2.0g/dL，离子强度为0.05-0.20mol/kg，pH值为5.7-6.0；再将该体系于0至-10℃搅拌0.3-1h，随后进行分离处理，得到第四分离组分沉淀物和第四分离组分上清液。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于：

所述制备方法还包括：亲和层析法去除所述血浆蛋白分离物中IgM的步骤和除菌步骤。

3.根据权利要求2所述应用，其特征在于：

所述亲和层析法去除所述血浆蛋白分离物中IgM步骤中，亲和层析处理采用的亲和层析预装柱的填料为2-巯基吡啶连接琼脂糖。

4.根据权利要求2所述应用，其特征在于：

所述亲和层析处理的步骤包括：

利用1-10倍柱体积的结合液平衡层析柱；

再将所述血浆蛋白分离物上样；

再利用10-20倍柱体积的结合液洗出蛋白组分并检测，得到去除IgM的所述血浆蛋白分离物。

5.根据权利要求4所述应用，其特征在于：

所述亲和层析处理的步骤包括：

利用5倍柱体积的结合液平衡层析柱；

再将所述血浆蛋白分离物上样；

再利用15倍柱体积的结合液洗出蛋白组分并检测，得到去除IgM的所述血浆蛋白分离物。

6.根据权利要求2所述应用，其特征在于：

所述除菌步骤中，将去除IgM的所述血浆蛋白分离物过滤除菌，得到无菌的所述血浆蛋白分离物。

7.根据权利要求6所述应用，其特征在于：

所述过滤除菌的滤膜为0.22μm低蛋白吸附的PVDF膜，压力为不超过10bar。