[发明专利]抗IDH1R132H单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了抗IDH1 R132H单克隆抗体及其应用。本发明的抗IDH1 R132H单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。本发明还公开了分泌所述抗IDH1 R132H单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其保藏编号为CGMCC No.15783。通过实验证明：本发明的抗IDH1 R132H单克隆抗体比H09克隆所产生的抗IDH1 R132H单克隆抗体亲和力更高，且特异性好、灵敏度高，可用于检测胶质瘤样本中的IDH1 R132H突变。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及抗IDH1 R132H单克隆抗体及其应用。

背景技术

神经胶质瘤是成人中最常见的原发性颅内肿瘤，严重影响患者的认知、语言及运动等功能。其5年病死率在全身肿瘤中位列第三，是全球难治性肿瘤之一。按照胶质瘤细胞与星形胶质细胞或少突胶质细胞在形态学上的相似性，WHO胶质瘤分类方案将成人弥散性胶质瘤主要划分为星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤；同时根据细胞的异型性、细胞增殖情况、血管增生以及坏死情况等，将各形态学亚型的胶质瘤按照恶性级别进一步诊断为I到IV级。其中I、II级为低恶性度胶质瘤(I级星形细胞瘤仅发生于儿童)，Ⅲ、Ⅳ为高恶性度胶质瘤。在初次诊断的胶质瘤病人中，50％以上为恶性程度最高的IV级胶质瘤(即胶质母细胞瘤，GBM)，GBM患者的中位生存期仅有14个月左右，目前最好的治疗方案也只能短暂地延长患者生存期。此外，低恶性级别胶质瘤常常进展为高恶性级别的胶质瘤，导致病情恶化。不同的低恶性级别胶质瘤进展速度差异较大，其中机制仍不清楚。

异柠檬酸脱氢酶(IDH)是三羧酸循环的关键酶，主要分为IDH1、IDH2和IDH3亚型。研究表明，IDH1(R132H)突变(IDH1第132位由精氨酸突变为组氨酸，下文简称为IDH1突变)为部分神经胶质瘤的主要标志物。无论是Ⅲ、Ⅳ级的高恶性度胶质瘤，还是II级的低恶性度胶质瘤，含IDH1突变与不含IDH1突变的胶质瘤在其细胞学和遗传学起源、及临床表型上均有本质区别。含IDH1突变的胶质瘤可能起源于少突胶质祖细胞，大约40％的IDH1突变胶质瘤携带染色体1p19q共缺失，发病中位年龄在40岁左右，生存期可达10年以上。而IDH1野生型胶质瘤可能起源于神经干细胞，携带与7号染色体扩增相伴随的10号染色体丢失，发病年龄在50岁以上，中位生存期为15个月以下。因此，2016年的WHO胶质瘤诊断指南将IDH1突变定义为胶质瘤诊断和治疗的一个重要标志物。

胶质瘤样本中的IDH1突变，可以用Sanger测序、焦磷酸测序或NGS测序检测，但基于测序的检测方案无法与肿瘤的形态学结合，而胶质瘤样本都不同程度包含正常脑组织，因此，有一部分样本中的测序结果可能是假阴性结果。而基于抗体的免疫组化检测可与形态学紧密结合，能鉴别正常脑组织和胶质瘤组织，因此避免了测序实验中的假阴性结果。德国Dianova公司首先建立了针对IDH1突变的单克隆抗体(H09克隆)，证明单克隆抗体在诊断IDH1突变的可行性。国内虽然已有单位申请针对IDH1突变的单克隆抗体，但尚无已经授权的专利和临床许可的产品。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种抗IDH1 R132H单克隆抗体。

本发明提供的抗IDH1 R132H单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区；所述重链可变区包括三个互补决定区CDRH1、CDRH2、CDRH3；所述轻链可变区包括三个互补决定区CDRL1、CDRL2、CDRL3；

所述CDRH1的氨基酸序列为如下(a1)或(a2)或(a3)：

(a1)SEQ ID No.2第50-54位所示的氨基酸序列；

(a2)将SEQ ID No.2第50-54位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的氨基酸序列；

(a3)与SEQ ID No.2第50-54位所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的氨基酸序列；