[发明专利]一种制备西红花苷III的方法

说明书

本发明公开了一种制备西红花苷III的方法，属于中药活性组分分离纯化技术领域。本发明以盛开的密蒙花为原料，经提取浓缩、大孔树脂富集、葡聚糖凝胶柱层析、重结晶后得高纯度西红花苷III，纯度≥95％；本发明通过优化得到最佳提取、富集工艺，提高了西红花苷III的提取效率和纯度；本发明提供的一种制备西红花苷III的方法，该工艺过程稳定、环境友好、简便易行，打破了无标准化制备西红花苷III工艺流程的现状，极大提高密蒙花的综合利用价值。

技术领域

本发明属于中药活性组分分离纯化技术领域，具体涉及一种制备西红花苷III的方法，尤其涉及一种采用大孔树脂富集和柱层析分离技术制备西红花苷III的方法。

背景技术

密蒙花为马钱科醉鱼草属植物密蒙花Buddleia officinalis Maxim.的干燥花蕾和花序，又名黄饭花、鸡骨头花、染饭花等，广泛分布于我国的贵州、云南等地，多为花蕾密聚的花序小分枝，呈不规则圆锥状，表面灰黄色或棕黄色，密被茸毛，在春季花未开放时采收。密蒙花是传统的眼科用药，具有清热泻火，养肝明目，退翳的功效，多用于目赤肿痛，多泪羞明，目生翳膜，肝虚目暗，视物昏花等症。

大孔树脂是20世纪70年代初发展起来的一种以苯乙烯和丙酸酯为原料加入致孔剂形成的多孔性吸附剂，与其他分离技术相比，大孔树脂具有稳定性高，吸附容量大，成本低，易于活化再生等优点。近年来，大孔树脂在天然药物富集纯化中广泛应用，为一种提取分离活性成分的有效方法。本发明首次采用大孔树脂对密蒙花中西红花苷类成分进行富集纯化，旨在探索最佳工艺条件，为西红花苷III的分离纯化提供方法并为工业化生产提供技术参数。

色谱分离技术创始于20世纪初，如今色谱法广泛应用于各个领域，成为多组分混合物最重要的分离方法。凝胶柱层析又被称为分子排组色谱法或空间排阻色谱法，利用凝胶作填充介质，根据被分离物质分子大小、形状不同扩散到凝胶孔隙内的速度不同，因而通过层析柱的快慢不同而实现分离的一种方法。一般当样品进入色谱柱后，分子量大的分子因不能渗透到凝胶孔穴内部，因此较为顺利地通过凝胶柱而较早地被流动相冲洗出来，分子量较小的分子则被较晚冲洗出来从而实现对化合物的分离。

西红花苷是一类水溶性类胡萝卜素成分，主要分布于西红花、栀子和密蒙花等中。西红花苷III在上述三种药用植物中均有分布，但由于西红花较为昂贵，有“植物黄金”之称，而栀子中西红花苷III含量低(仅为0.19mg/g～0.31mg/g)。实验前期对密蒙花不同花期(花蕾期、初花期、盛花期、枯花期)化学成分含量变化进行了研究，结果表明盛花期时西红花苷III的含量较高(2.23mg/g～3.83mg/g)，且密蒙花野生资源丰富，因此本发明选用盛开的密蒙花为原料。

西红花苷III(Crocin III)，分子式为C₃₂H₄₄O₁₄，分子量为652，其结构式为：

西红花苷III不仅作为食用色素和染料，近年来西红花苷III因其在降压、抗血栓、抗炎、抗抑郁以及抗肿瘤等方面表现出较好的活性而受到广泛关注。然而目前西红花苷III无规范的制备工艺流程，生产周期长，试剂浪费严重且难以保证西红花苷III的得率和纯度，从而极大地限制了西红花苷III在医药、食品和化工等方面的应用。通过文献调研尚未见从密蒙花中提取分离高纯度西红花苷III的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备西红花苷III的方法，该工艺过程稳定、环境友好、简便易行，分离制得了高纯度的西红花苷III，极大提高了密蒙花的综合利用价值。

本发明涉及一种制备西红花苷III的方法，以马钱科醉鱼草属植物密蒙花盛开的花为原材料，经提取、浓缩后干燥、大孔树脂富集、葡聚糖凝胶柱层析、重结晶得到高纯度西红花苷III，操作包括：

(1)提取