[发明专利]以尿液为检测样本的早孕检测试剂盒、其生产方法及用途

说明书

本发明属于医疗保健技术领域，具体提供了一种以尿液为检测样本的早孕检测试剂盒的生产方法，该生产方法采用胶体金免疫层析技术原理，应用双抗体夹心法技术，在硝酸纤维素膜的T1检测线包被抗β‑HCG核心片段单抗，T2检测线包被抗α‑HCG单抗，质控线包被羊抗鼠IgG多抗抗体。并通过一些列生产工艺操作步骤和工艺参数的控制，生产获得一种灵敏度和特异性高、稳定性好、并能够快速的对是否怀孕以及是否异位妊娠进行检测。相应的，本发明还提供了所述生产方法相应的产品和用途。

技术领域

本发明属于医疗保健技术领域，具体涉及一种以尿液为检测样本的早孕检测试剂盒、其制备方法及用途。

背景技术

大多数女性出现乏力、头晕、恶心、呕吐等早孕反应现象是在第6～8周才开始的，并多在怀孕12周左右消失。而一些意外怀孕的女性在6～8周之前是没有明显的早孕反应的。近年来，现代女性忽视医疗保健，不节制地做人工流产，导致国内宫外孕的发生率大幅增加。除了人流容易导致的宫外孕问题，慢性输卵管炎、盆腔子宫内膜异位、输卵管阻塞后再通以及输卵管发育不良或畸形等均是女性容易发生异位妊娠的重要原因，而宫外孕异位妊娠又是世界范围内母体发病率和高死亡率的重要原因。因此，如何尽早的判断是否怀孕以及怀孕是否异常是一个很重要的研究课题。

目前，现有技术中通过抽血、超声、HCG检测与超声相结合的方法来检测怀孕天数或是检测子宫外孕。这些方法专业度高、操作检测时间长、相对复杂。

因此，如何提供一种简单经济、并且专业度要求低的早孕检测方式是亟待解决的问题。

为了解决上述问题，现有技术中的中国发明专利公开了一系列用于早孕检测的试纸条、试剂盒以及检测试纸等。但是这些方法和产品普遍仍存在检测准确度低、无法检测出异常妊娠等问题。

发明内容

为了解决现有技术存在的上述问题，本发明目的在于提供一种以尿液为检测样本的早孕检测试剂盒的生产方法。基于该生产方法获得的早孕检测试剂盒灵敏度和特异性高，并且以尿液为检测对象，检测方便。并且所述生产方法操作简便，能够快速的大批量获取目标早孕检测试剂盒，工业化价值高，适于推广应用。在所提供的生产方法的基础上，本发明还提供了生产所得的早孕检测试剂盒以及他们各自的用途。

基于目的，本发明首先提供一种以尿液为检测样本的早孕检测试剂盒的生产方法，包括以下步骤：

Step 1.NC膜的制备：将25*300mm的NC膜粘贴在75*300mm的PVC底板上。

Step 2.包被液的配制：用磷酸盐缓冲液配制浓度为1.2mg/ml的抗β-HCG核心片段单抗、浓度为1.0mg/ml的抗α-HCG单抗、浓度为1.0mg/ml的羊抗鼠IgG多抗抗体。

Step 3.NC膜的包被及干燥：将配置好的抗β-HCG核心片段单抗、抗α-HCG单抗和羊抗鼠IgG多抗抗体依次分别包被在NC膜上的T1检测线、T2检测线和质控线C上；包被完成后45℃条件下干燥48±3h得到包被干燥好的NC膜备用。

Step 4.制备化学偶合物垫：将5％的海藻糖、0.1％BSA、12.2％的2mM硼酸和0.1％PEG缓冲液加入配液罐，用TE缓冲液定容至所需体积，搅拌均匀，将玻璃纤维素膜置入浸泡30分钟后取出，37℃干燥得到化学偶合物垫备用。

Step 5.制备样品垫：将1％的海藻糖、1.2％的酪蛋白，用2mM硼酸和0.1％PEG缓冲液定容至所需体积，搅拌均匀，将玻璃纤维素膜置入浸泡30分钟后取出，37℃干燥得到封闭的样品垫备用。

Step 6.胶体金的制备：称取柠檬酸三钠溶于纯化水，加热煮沸，加入1％的四氯金酸反应直至溶液变为酒红色，冷却至室温存放。