[发明专利]用于组织细胞染色的切片制作方法

说明书

一种用于组织细胞染色的切片制作方法，发明内容改变以前传统组织块固定、脱水、透明、包埋方法。同时变革组织细胞染色的切片制作方法，包含有具有载有组织切片1的载玻片2的切片装置本体、设置在载玻片2上的内盖玻片3、设置在内盖玻片3与载玻片2之间并且用于浸泡组织切片1的内衬层4，通过切片装置本体，对组织切片1进行封闭，通过内盖玻片3和内衬层4，对组织切片1进行液体包裹，消除了组织切片1的周边气泡，外盖玻片5借助外衬层6对整个切片装置固定密封，从而隔绝了不利因素对组织标本的侵害，达到保持染色艳丽以及长期保持的目的。

技术领域

本发明涉及一种用于组织细胞染色的切片制作方法，改变了传统制作过程，尤其是发明一种切片装置，使得各种封片长期保存（传统脂类染色制片保存期短）。

背景技术

组织细胞染色的切片制作方法常用的是石蜡切片和冷冻切片技术，传统组织细胞染色的切片制作方法由于使用乙醇脱水，二甲苯透明，脂质脱失。如果观察脂质染色，必须应用冷冻切片技术，避开了乙醇脱水、二甲苯透明等步骤，但是此类脂质染色切片保存期短暂，不能够满足教学科研要求。

本发明应用聚乙二醇400固定组织块，应用升高梯度浓度的聚乙二醇400对组织块脱水，再逐步过渡到聚乙二醇1500替代组织块中的聚乙二醇400，最后应用聚乙二醇4000替代聚乙二醇1500，常温下聚乙二醇4000与组织块硬化，完成组织块包埋。本发明根据染色目的进行常规染色过程，本发明应用两种封片剂，采用双盖玻片封存，避免了乙醇、二甲苯等有机溶剂与组织接触和冷冻切片的严苛条件，成功完成组织细胞染色的切片制作。改变了传统的脂质染色切片保存期短暂问题，从而能够满足教学科研要求。

基于现有的技术问题、技术特征和技术效果，做出本发明的申请技术方案。。

发明内容

本发明的客体是一种用于组织细胞染色的切片制作方法。

为了克服传统石蜡切片技术缺点，本发明的目的是提供一种用于各种组织细胞的固定、脱水、包埋、染色、封片方法，从而保持了组织切片1的染色艳丽度并且解决了组织切片长期保存的问题。

为达到上述目的，本发明采取的技术方案是：

①组织块固定：20%聚乙二醇400固定组织块，恒温37℃，持续时间6小时。②组织块脱水：组织块陆续放入30%聚乙二醇400、40%聚乙二醇400、50%聚乙二醇400、60%聚乙二醇400、70%聚乙二醇400、80%聚乙二醇400、100%聚乙二醇400顺浓度梯度脱水，恒温37℃，每梯度持续时间2小时。

③组织块包埋：聚乙二醇1500和聚乙二醇4000放入50℃恒温箱熔融，脱水组织块放入聚乙二醇1500中30分钟；再转入聚乙二醇1500、聚乙二醇4000各半液体中30分钟；然后转入聚乙二醇4000液体中30分钟。最后将聚乙二醇4000液体倒入组织包埋框，调整组织块摆放位置，常温冷却。

④常规修整组织块，常规切片及染色。

⑤封片制作：为保证达到应用效果，必须遵循以下注意事项。

包含有具有载有组织切片1的载玻片2的切片装置本体、设置在载玻片2上的内盖玻片3、设置在内盖玻片3与载玻片2之间并且用于浸泡试样切片1的内衬层4。

由于设计了内盖玻片3、内衬层4和切片装置本体，通过切片装置本体，对试样切片1进行固定，通过内盖玻片3和内衬层4，对试样切片1进行液体包裹，消除了试样切片1的周边气泡，不再都是使用两个玻璃片进行夹持固定，因此保持了试样切片1的染色艳丽度。

本发明设计了，按照液体填充周边区间的方式把用于形成填充区间的内盖玻片3、具有液体状态的内衬层4和用于载体支撑的切片装置本体相互联接。

本发明设计了，按照形成液体夹持区间的方式把内盖玻片3和内衬层4与切片装置本体联接。