[发明专利]利用糖基转移酶启动子驱动GA20ox改良纳米纤维素特性的方法

权利要求书

1.利用糖基转移酶8D1启动子驱动GA20ox改良纳米纤维素特性的方法，包括利用木质部特异表达的糖基转移酶8D1启动子驱动赤霉素氧化酶GA20ox基因过量表达改变杨树木材纳米纤维素特性。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于：所述杨树为84K银腺杨。

3.根据权利要求1或2中任一项所述的方法，包括通过获得在杨树茎秆木质部中特异表达的启动子8D1P驱动GA20ox基因过量表达的重组载体，并将重组载体用于杨树的遗传转化，得到纳米纤维素特性改良的8D1P:GA20ox转基因84K杨树；

所述转基因杨树的木材纳米纤维素特性改良体现为纳米纤维素直径增大、纳米纤维素的长径比增大。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：过表达转基因植株相对于对照型植株的纳米纤维素直径增大1.5倍，纳米纤维素直径由对照组约40nm增加到约100nm。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述糖基转移酶8D1启动子通过在杨树木质部中特异性地过量表达GA20ox调节赤霉素(GA3，GA9)及异戊烯腺嘌呤(IP)的合成促进杨树生长，并改变杨树木材纳米纤维素特性。

6.一种培育木材纳米纤维素特性改良的转基因杨树的方法，其包括：

A、获得包括糖基转移酶8D1启动子和赤霉素氧化酶GA20ox基因的表达盒，并构建重组载体；

B、将所述重组载体转入杨树，得到8D1P:GA20ox转基因杨树。

7.根据权利要求6所述的方法，包括：

A、获得含有8D1P:GA20ox基因表达盒的重组载体；

B、选取生长状态良好的杨树叶片放入分化培养基中，在黑暗条件下进行预培养；

C、将所述重组载体通过转化侵染转入所述杨树叶片中，得到8D1P:GA20ox转基因杨树植株。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：培育所述8D1P:GA20ox转基因84K杨树的步骤包括：

A、取拟南芥茎干提取总RNA，并对拟南芥GA20ox基因的序列信息与特性进行分析，确定GA20ox基因的表达模式；

B、构建GA20ox基因过表达载体，将GA20ox基因全长cDNA正向连接到pBI121-PtrGT8D1P载体中，测序正确后得到含有GA20ox基因的植物过表达载体；

C、选取状态良好的84K杨叶片放入分化培养基中黑暗预培养3天，将GA20ox过表达载体转入农杆菌，制备成侵染液；

D、采用用侵染液侵染84K杨叶片后放回原培养基中，在共培养3天后转至筛选培养基中，每15天换1次培养基，待可见芽出现，再把叶盘转至芽伸长培养基，待不定芽长至3cm左右时时转入生根培养基诱导生根，之后培养成壮苗，得到8D1P:GA20ox转基因84K杨树。