[发明专利]大熊猫促黄体素β亚基单克隆抗体的制备及应用在审
| 申请号： | 201810752695.7 | 申请日： | 2018-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN108823172A | 公开（公告）日： | 2018-11-16 |
| 发明（设计）人： | 蔡开来;侯蓉;张志和;张梦诗;王涓;刘玉良 | 申请（专利权）人： | 成都大熊猫繁育研究基地 |
| 主分类号： | C12N5/20 | 分类号： | C12N5/20;C07K16/26;G01N33/76 |
| 代理公司： | 成都弘毅天承知识产权代理有限公司 51230 | 代理人： | 白小明 |
| 地址： | 610081 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 单克隆抗体 拮抗物 大熊猫 杂交瘤细胞株 促黄体素 生殖生理 分泌 制备 细胞融合技术 发情 应用 生物学技术 特异性配体 保藏 排卵 表达信息 创造条件 蛋白检测 细胞株 配体 妊娠 蛋白 基因 调控 发现 研究 | ||
1.抗大熊猫LHβ亚基单克隆抗体杂交瘤细胞株14081-1-9，保藏编号：CCTCC NO:C2018128。
2.权利要求1所述的抗大熊猫LHβ亚基单克隆抗体杂交瘤细胞株14081-1-9用于产生抗大熊猫LHβ亚基单克隆抗体。
3.抗大熊猫LHβ亚基单克隆抗体，其特征在于，由杂交瘤细胞株14081-1-9产生，亚型均为IgG1。
4.权利要求3所述的抗大熊猫LHβ亚基单克隆抗体在western blot技术中的应用。
5.抗大熊猫LHβ亚基单克隆抗体的制备方法，其特征在于，步骤如下：
(1)设计大熊猫LHβ特异的序列如SEQ ID NO:1所示，人工合成具有SEQ ID NO:1所示序列的多肽片段，并与KLH偶联，作为增强免疫原性作为生产特异性抗体的免疫原LHβ-KLH；
(2)将步骤(1)中所述的免疫原LHβ-KLH和佐剂一起注射至小鼠腹腔免疫小鼠，多次免疫，直至血清效价达标为止；
(3)采用常规方法进行细胞融合，得到杂交瘤细胞；
(4)对步骤(3)得到的杂交瘤细胞进行阳性克隆的筛选，选择阳性细胞孔进行细胞克隆，通过有限稀释法得到抗大熊猫LHβ单克隆抗体杂交瘤细胞株14081-1-9，并进行亚型鉴定；
(5)对步骤(4)中所得的杂交瘤细胞株14081-1-9大量培养，收集细胞培养的上清液，纯化并浓缩得到特异性抗大熊猫LHβ单克隆抗体。
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