[发明专利]含有Apelin-12的药物组合物及其用途

说明书

本发明涉及一种内源性配体Apelin‑12，该内源性配体通过作用APJ受体促血小板聚集以及促血栓形成作用，并可以协同ADP和胶原诱导的促血小板聚集以及促血栓形成作用。Apelin‑12在出血性疾病的基础研究以作为一种新型促血小板聚集以及血栓形成的药物。

技术领域

本发明涉及含有Apelin-12的药物组合物及其用途。Apelin-12本身能通过APJ受体促血小板聚集，并且还具有协同ADP和胶原诱导的促血小板聚集以及外血栓形成的作用。

背景技术

APJ受体是一种与血管紧张素Ⅰ型受体有高同源性的G蛋白偶联受体，Apelin为其内源性配体。人类Apelin基因位于X染色体q25-26段，其编码产物为含有77个氨基酸的前体肽，随后被裂解为不同氨基酸长度的片段，包括：Apelin-12、Apelin-13、Apelin-17和Apelin-36等。Apelin/APJ系统在组织分布广泛，生理、病理作用丰富，对心血管功能调控、能量代谢体液平衡、血管生成等发挥着重要作用。

血小板是一种从骨髓成熟的巨核细胞胞质裂解脱落下来的细胞碎片，体积微小，无细胞核。未活化的血小板呈双凸圆盘状，易受机械、化学刺激而活化。活化状态的血小板会伸出足突，并分泌相应的粘附蛋白，使血小板间相互粘附而发生聚集。血小板聚集是血栓及血栓性疾病形成的重要环节。当机体血管内皮发生损伤或者炎症时，血小板即活化发生聚集，进而启动凝血过程。多数血栓的形成都与血小板过度活化，发生不可逆的聚集作用引起。因此，研究引起血小板发生聚集的内源性因子，探索诱发血小板聚集所激活的受体或通道，将为开发抑制血小板聚集药物及寻找相应的作用靶点提供新的理论。

Apelin/APJ系统发挥相应功能的过程中，它可能对血小板聚集有影响的证据也逐渐显现出来。2005年学者报道[29,30]Apelin具有增强心肌收缩力，扩张血管的作用，而心肌收缩力的增加及其血管舒张作用的发生与Na+/H+和Na+/Ca2+交换体有关。2013年ModgilA等报道[32]Apelin通过PI3K途径抑制了Ca2+依赖性K+通道促进脑动脉平滑肌细胞收缩。血小板活化的标志和始动因素之一是血小板胞浆内Ca2+浓度的升高。血小板内Ca2+浓度增加可激活ATP酶，引起ATP的释放，为血小板提供能量，而促进血小板的活化。Ca2+全程参与到血小板活化、粘附、聚集以及血栓形成过程中。

此外，本申请发明人发现，Apelin通过14-3-3-ERK1/2信号通路促进大鼠血管平滑肌细胞增殖。当血小板发生活化时，14-3-3像其他血小板分泌蛋白一样分泌到膜外，参与血栓的形成。组织因子(tissue factor，TF)在血管壁的完整性遭到破坏时，通过激活凝固级联反应发挥止血作用。2015年Cirillo等[37]报道在单核细胞向内皮细胞粘附过程中，Apelin能够促凝因子TF的表达。这些报道预示着Apelin具有血栓和血管功能的调节作用。而2007年Kuba等[38]报道Apelin敲除小鼠会导致压力超负荷诱导的心力衰竭，并且有尾部出血时间缩短和促血栓形成的风险。然而，近期Adam等[39]又报道Apelin-13抑制胶原和凝血酶诱导的血小板聚集，延长小鼠尾部出血的时间。这又表明Apelin是一个抑制血小板聚集的因子。

目前关于APJ配体亚型Apelin-12研究主要集中在心肌收缩、心肌保护及血液动力学等方面，而Apelin-12与血小板功能及血栓形成方面尚未有任何报道。本专利主要探讨了Apelin-12与血小板聚集和血栓形成的功能研究。发现Apelin-12可以通过激活APJ受体来促进血小板聚集以及体外血栓形成。APJ受体阻断剂F13A抑制Apelin-12诱导的血小板聚集及体外血栓形成。

发明内容

本发明提供一种治疗出血性疾病的药物组合物，它包含内源性配体Apelin-12。

本发明还提供上述内源性配体Apelin-12用于制备药物的用途，其中该药物用于治疗由血小板聚集障碍所引起的出血性疾病；或该药物预防血小板聚集或预防血栓形成。