[发明专利]一种利用淀粉废水生产虾青素的方法

权利要求书

1.一种利用淀粉废水生产虾青素的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤1）淀粉废水预处理；

步骤2）制备混合菌液：将解淀粉芽孢杆菌培养液、植物乳杆菌培养液以及沼泽红假单胞菌培养液按照5-7:3-5:3-5的体积比混合得到复合菌液；

步骤3）菌藻混合培养：将经过预处理后的淀粉废水注入到生物反应池，首先将复合菌液按照1:（200-400）的体积比接入到淀粉废水，生物处理24-48h，然后取对数生长期的雨生红球藻，按照1:（100-200）的体积比接入到淀粉废水，光强在5000-8000lux，光暗比为12:12，培养时间为8-10天；然后将液体进行离心，离心速度为2000-3000rpm，离心时间为10-20min，收集沉淀物；

步骤4）提取虾青素；

所述步骤1）淀粉废水预处理，包括如下步骤：淀粉废水首先进入沉淀池，沉淀时间为12-24h，随后进入酸碱调节池，调节pH为7.0-7.5；

所述步骤4）提取虾青素，包括如下步骤：将沉淀物水洗两次，然后冷冻干燥得到粉末；然后按照1kg粉末：1-2L溶剂的量添加溶剂，超声破壁，超声功率为300W，每次超声时间为10s，间歇时间为10s，总超声时间为60min，再静置30min，然后3000rpm离心5min，收集上清液和沉淀，往沉淀中添加相同体积的丙酮，采用超声处理30min，超声功率为300W，每次超声时间为10s，间歇时间为10s，然后3000rpm离心3min，收集上清液；合并两次上清液，低温蒸干，残留物用乙醚溶解，然后加入相同质量的浓度为0.1mol/L的KOH/甲醇溶液，置于4℃下皂化12h，得到虾青素粗提物；所述溶剂由乙酸乙酯和乙醇按照1:2的体积比混匀制得。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌培养液的制备方法包括如下步骤：将解淀粉芽孢杆菌接种到LB固体培养基上培养，得到单菌落；挑取单菌落接种到LB液体培养基上进行扩大培养，获得浓度为5-7×10⁸cfu/ml的解淀粉芽孢杆菌培养液。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物乳杆菌培养液的制备方法包括如下步骤：将植物乳杆菌接种到MRS固体培养基上培养，得到单菌落，然后接入到MRS液体培养基中进行扩大培养，培养至浓度为3-5×10⁸cfu/ml的植物乳杆菌培养液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌培养液的制备方法包括如下步骤：将沼泽红假单胞菌在LB平板上划线培养，得到单菌落；挑取单菌落接入扩大培养基上培养，培养至浓度为3-5×10⁸cfu/ml的沼泽红假单胞菌培养液；所述扩大培养基的组分为：葡萄糖 10g/L、玉米浆8g/L、氯化铵1g/L、磷酸二氢钾0.1g/L、磷酸氢二钾0.1g/L、七水硫酸亚铁0.01g/L、七水硫酸镁0.01g/L。