[发明专利]塞尼卡谷病毒的LAMP检测引物对及检测方法

说明书

本发明涉及病毒检测技术领域，特别涉及塞尼卡谷病毒的LAMP检测引物对，还涉及使用上述引物对的检测方法。该方法特异性高，敏感性与荧光定量PCR一致，而且快速、便捷，可用于SVV的检测，具有较好应用前景。

技术领域

本发明涉及病毒检测技术领域，特别涉及塞尼卡谷病毒的LAMP检测引物对，还涉及使用上述引物对的检测方法。

背景技术

猪塞尼卡谷病毒（SVV）为最近国内外猪群中新流行的病原，对于养猪业产生较大的威胁。我国是养猪大国，也是最大的生猪生产基地，所以一旦有新的疾病的爆发如果不能加以制止，可能会对我国的养猪业产生巨大的影响，并且造成不小的经济损失。需要高度重视病原的流行动态，做到防患于未然。因此对新发病原建立简单有效的检测方法显得尤为重要。

塞尼卡谷病毒(Seneca Valley Virus)是一种阳性的单链RNA病毒，属小RNA家族。2002年美国马里兰州的盖瑟斯堡塞内卡谷(Seneca Valley)，在PER.C6（转化的胎儿成视网膜细胞）细胞中首次被发现。病毒名称由此而来，即塞尼卡谷病毒，又称塞尼卡病毒A(Senecavirus A，SVA)。加拿大和美国分别在2007年和2012年报告过与此病毒相关的水泡病病例，但是一直到2014年底，关于猪感染该病毒的流行病学、传播和发病机制、病理和临床症状以及诊断等方面的进展甚少，报告的病例也仅在北美国家出现。2015年初，在巴西、中国和泰国相继暴发了猪水泡性疾病，通过分离鉴定获得了塞尼卡谷病毒。与此同时，在美国也发生了新的病例，这引起了世界上很多国家的重视。

目前，常规RT-PCR(qRT-PCR)是最常用的病毒检测方法。qRT-PCR是快速、敏感和特异性强，是能够快速准确地诊断塞尼卡谷病毒的方法。但是，由于塞尼卡谷病毒基因遗传变异，导致病毒检测准确性和灵敏度降低，需要设计更为合适的引物序列用于塞尼卡谷病毒的分子检测，提高特异性和敏感性。

我国于2015年首次发现该病，并逐渐流行，引起我国学者和养猪业高度关注。目前，我国尚无快速诊断方法和商品疫苗。

发明内容

为了解决以上现有技术中塞尼卡谷病毒检测中存在的准确性和灵敏度的问题，本申请提供了一种准确性高、灵敏度强的塞尼卡谷病毒的LAMP检测引物对。

本发明还提供了一种塞尼卡谷病毒的LAMP检测方法。

本发明是通过以下步骤得到的：

塞尼卡谷病毒的LAMP检测引物对，碱基序列如下：

外引物对F3：5^，-ACACTGCCATAAACACGCAA-3^，，

B3：5^，-TCCCTGTCTAGACAGGAAGG-3^，，

内引物对FIP：5^，-TGATCTGTGCTGCTGGACGGA-TGGGTGTGTTGTGTGCCTA-3^，，

BIP：5^，-CCATCGACAGGTGGTACACTGG-CGGCCTGAAAAGAGAAGGTT-3^，。

一种塞尼卡谷病毒的LAMP检测方法，待检样品使用权利要求1中的LAMP检测引物对使用LAMP方法进行检测。