[发明专利]检测H3K9me2和H3K36me3表达量的试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用有效

专利信息
申请号: 201810744519.9 申请日: 2018-07-09
公开(公告)号: CN108957004B 公开(公告)日: 2021-10-19
发明(设计)人: 樊红;李懿萍;郭迪迪;刘东声;陈平;钱琦;周梦晗 申请(专利权)人: 东南大学
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/574
代理公司: 南京众联专利代理有限公司 32206 代理人: 张慧清
地址: 211189 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 检测 h3k9me2 h3k36me3 表达 试剂 制备 胃癌 预后 评估 试剂盒 中的 应用
【说明书】:

本发明属于生物医学领域,特别是涉及医学诊断领域,更为具体的说是涉及检测H3K9me2和H3K36me3表达量的试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用,从而可以通过对胃癌预后预测,并利用免疫组化化学技术检测H3K9me2和H3K36me3的表达水平,从而获得预测胃癌预后情况,且H3K9me2和H3K36me3的引入方式简单,整个预测评估简便易行,可行性高。

技术领域

本发明属于生物医学领域,特别是涉及医学诊断领域,更为具体的说是涉及检测H3K9me2和H3K36me3表达量的试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用。

背景技术

胃癌属于世界四大癌症之一,我国是胃癌大国,目前发病率虽有所下降,但五年年生存率并没有明显提高。这主要是因为目前尚无有效的靶向药物。同时,由于胃癌患者的遗传基础不同,同样的化疗用药后可能形成具有明显差异的疗效。目前国内外尚没有能够有效进行术后预后预测的技术手段。

专利CN106990245A中公开了检测PITX1表达量的试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用,在此基础上,发明人及所在课题组继续对术后预后预测的技术手段进行深入研究。

发明内容

本发明的目的在于针对胃癌提供一种可靠的预后评估试剂盒,从而可以监控胃癌患者的预后情况,使其能够及时就诊;同时利用预后评估结果指定个体化治疗方案,合理应用化疗药物,避免无效的化疗,有效提高患者生存期。

为了实现上述发明目的,我们公开了检测H3K9me2和H3K36me3表达量的试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用。

并且,进一步的我们公开了检测H3K9me2表达量的试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用,以及检测H3K36me3表达量的试剂在制备胃癌预后评估试剂盒中的应用。

胃癌患者的生存期与H3K9me2和H3K36me3的表达有关,可以通过检测患者该基因的表达水平指导临床胃癌化疗用药,提高疗效。据此,我们提出H3K9me2和H3K36me3基因检测可以应用于胃癌预后判定与化疗耐药评估。从而可以精确地预测胃癌预后,并且可以基于预测的预后有效地建立最佳的个体治疗方案,以显著减少由胃癌引起的死亡。

在本发明中我们公开了对H3K9me2和H3K36me3采用免疫组化方法检测。

利用免疫组化方法检测中我们所采用的检测试剂主要是由H3K9me2和H3K36me3抗体、HRP标记二抗和组化试剂盒DAB显色剂组成。

其中H3K9me2单克隆抗体具体来说是指(1:200,小鼠源性,Abcam,ab1220),H3K36me3多克隆抗体具体来说是指 (1:200,兔源性,Novus Biologicals,Abcam, ab9050 ),HRP标记二抗是指DAKO、K5007即用型,组化试剂盒DAB显色剂是指DAKO、K5007, 1:100。

试剂盒中包含有检测生物样品中检测H3K9me2和H3K36me3表达量的试剂,用于该检测的生物样品为福尔马林固定和/或石蜡包埋的胃癌组织。

所述的检测试剂盒,通过以下步骤用于胃癌的预后判断:(a).检测生物样品中的H3K9me2和H3K36me3表达量,(b).根据(a)中检测到的H3K9me2和H3K36me3表达量将结果分为高表达和低表达(或者为不表达)两种,(1)H3K9me2高表达患者:病人胃癌组织H3K9me2蛋白表达量高者,预后较不/低表达患者差。(2)H3K9me2和H3K36me3高表达患者:病人胃癌组织H3K9me2和H3K36me3蛋白表达量同时低者或者不一致者(即一高一低),因其预后都较同时高表达组好,要密切随访病人,及时复查相应的肿瘤指征。

这里所说的低表达是指阴性、假阳性和弱阳性,高表达是指阳性和强阳性。

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