[发明专利]一种蟾皮有效部位及其制备方法

说明书

本发明公开了一种蟾皮有效部位及其制备方法，属于中药领域。制备方法包括对蟾皮药材进行回流提取，经脱脂萃取分离，再经柱层析纯化，获得蟾皮有效部位。本发明所制备的有效部位中可准确定量的蟾蜍二烯内酯类成分含量高于50％，工艺简便，条件温和，分离效果好，收率高，产品质量稳定，所用有机溶剂容易回收利用，成本低，可实现线性放大、适合工业化生产。本发明制备的蟾皮有效部位，对于综合开中药/天然药物创新药具有重要的应用前景。

技术领域

本发明属于中药加工技术领域，特别是涉及一种蟾皮有效部位以及一种蟾皮有效部位的制备方法。

背景技术

蟾皮是是蟾蜍科(Bufonidae)动物中华大蟾蜍或黑框蟾蜍的干燥皮，又称蛤蚆皮、癞蟆皮，于夏、秋季捕捉后剥下整皮，晒干而得。本品最早记载于《本经逢原》，自古至今沿用，其性味辛、凉、微毒，主入胃经，具有清热解毒，利水消胀的功效，主治痈疽、肿毒、瘰疬、肿瘤、疳积腹胀、慢性气管炎等症。《本草纲目》记载“蟾蜍其皮，主治恶疮、破症结、肿毒、肠头挺出和一切恶肿等”。

蟾皮的化学成分复杂，主要有蟾蜍甾二烯类化合物，吲哚碱类，甾醇类。其中蟾蜍二烯内酯类化合物是蟾皮中的主要有效成分，具有显著的洋地黄样作用、升压作用、呼吸兴奋作用及治疗原发性肝癌、肺癌、肠癌等。现代医学研究表明，蟾皮中的蟾蜍二烯内酯类化合物具有明显的抗肿瘤作用，对结肠癌、肝癌、胰腺癌、皮肤癌、白血病和宫颈癌等恶性肿瘤均有作用。近年来，用于多种癌症的治疗和配合放、化疗，不仅能够有效抑制癌细胞的过度增殖，还具有改善血象，减轻放、化疗毒副作用的功效，且不良反应小，使用安全、可靠，对骨髓无抑制作用等优点。临床上常用于治疗各种肿瘤、疖痈、腮腺炎、带状疱疹、乙型肝炎、骨髓炎和体表感染等疾病，临床应用广泛。

蟾蜍二烯内酯类化合物(Bufadienolides，BFD)是一类在C-17位连接有-吡喃酮环(-pyrone)的C-24甾体或其苷，为蟾皮发挥抗肿瘤活性的主要成分。蟾皮中所含BFD主要包括蟾毒灵(Bufalin)、酯蟾毒配基(Resibufogenin)、华蟾酥毒基(Cinobufagin)等。自1933年Stoll等分离得到第一个具有蟾蜍二烯内酯结构的ScillarenA，到发现蟾毒灵具有良好的抗癌活性(IC5035达10-9-10-10M)，BFD的抗癌作用逐渐被科学家们所认识。国内外多项研究表明BFD对包括肝癌、非小细胞肺癌、膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、直肠癌、胃癌、鼻咽癌、口腔癌、表皮癌、胶质瘤、发性骨髓瘤及白血病在内的十余种恶性肿瘤具有活性。远华蟾毒精、蟾毒灵、华蟾酥毒基以及酯蟾毒配基等化合物，能够作用于人子宫癌细胞(HHUA,HEC-1)、人前列腺癌细胞(LNCaP，DU145，PC3)、人白血病细胞(K562，U397，ML1，HL-60)、人类结肠癌细胞(Colon26-L5)、人卵巢癌细胞(SK-OV-3，omc-3)、人肝癌细胞(SMMC-7721，Bel-7402)并显著抑制癌细胞的生长和增殖。蟾毒灵能够使人类骨髓性白血病细胞株(K562，U397，ML1，HL-60)有效地诱导分化成巨噬细胞，并能能过通过下调细胞周期相关蛋白的表达，诱导人肝癌细胞HepG2细胞阻滞于G2/M期；同时有研究表明人白血病多药耐药K562/VCR细胞株对蟾毒灵无交叉耐药性。酯蟾毒配基对裸鼠的Hela宫颈癌移植瘤有明显的抑瘤作用。此外华蟾酥毒基还能保护和提高机体的免疫功能。

中药有效部位是指从中药中提取的一类或几类化学成分的混合体,其含量达到总提取物的50％以上,而且这一类或几类已知化学成分要被认为是有效成分。中药有效部位新药由于既能体现中药多成分、多靶点、多途径发挥药效的特点,又能使药物有效成分更加富集,药理作用和临床疗效增强,以及利于质量控制水平提高等优势,近年来成为中药、天然药新药开发的重要方向之一。