[发明专利]一种利用石榴加工废渣为主要原料培养蝉花孢子粉的方法

说明书

本发明公开了一种利用石榴加工废渣为主要原料培养蝉花孢子粉的方法，以石榴渣废料为原料来生产蝉花孢子粉，比较用大米或大麦粉为原料具有更高的孢子粉产量，可以缓解对大米或大麦粉的需求，有较高的经济效益和社会效益。本发明方法具有孢子产量高，方法简单的特点，实现了石榴渣废料的高附加值利用。

技术领域

本发明属于利用废弃物固体发酵培养药用真菌技术领域，具体涉及一种利用石榴加工废渣为主要原料培养蝉花孢子粉的方法。

技术背景

目前石榴的利用除了鲜食以外，还用于果汁产品的加工，其加工过程必然会产生很多的废弃物——石榴渣(皮籽混合物)，不仅造成了农产品资源的严重浪费，而且还可能会产生环境污染问题。研究表明石榴皮中含有较高的鞣质、树脂肪、可溶性糖、甘露醇等物质，石榴籽中含有较高的蛋白质、糖、甾体等成分，如何充分利用这部分的加工废料，是一个值得研究的问题。

蝉花孢子粉俗称为金蝉花的“种子”，其具有繁殖功能，是蝉花完全菌化后，从菌核长出的孢梗束末生发的，蝉花孢子粉是由菌核、孢梗束的活性成分逐渐转化而来，聚集了金蝉花的活性精华，是金蝉花药物活性成分、功效最高的部分。在2011年国际生物医药及生物技术论坛年会上，苏州大学药学院顾振纶教授报道了其科研成果《金蝉花孢子粉及野生金蝉花粗多糖抗肿瘤作用的初步报告》中指出，蝉花孢子粉对胰腺癌、白血病和宫颈癌细胞的凋亡率(有序的癌细胞死亡)分别是广谱抗癌药5-Fu的8.24倍、16.64倍和23.44倍；对癌细胞的坏死率(杀灭)分别是5-Fu的8.67倍、287.75倍和31.50倍。近年来，本课题组为配合淮北当地石榴加工产业与食用菌种植产业，进行了以石榴渣为主要原料栽培食用菌的研究。

发明内容

本发明目的在于提供一种利用石榴加工废渣为主要原料培养蝉花孢子粉的方法，本发明方法工艺简单，孢子粉产量高，能够批量规模化生产。

本发明利用石榴加工废渣为主要原料培养蝉花孢子粉的方法，包括如下步骤：

步骤1：蝉花种子培养液的配制

蝉花种子培养液的配方如下：玉米粉10～20g/L，葡萄糖10～20g/L，豆粕粉5～15g/L，酵母膏5～10g/L，K₂PO₄ 1～3g/L，MgSO₄.7H₂O 0.5～1.5g/L，溶剂为水；按上述比例调配并混匀后用NaOH溶液调节pH值至5.0～6.5。

步骤2：石榴废渣培养基的制备

取新鲜的石榴榨汁废渣，用滤布过滤控制含水量在20～25％；将50～80质量份石榴榨汁废渣、10～20质量份麸皮粉、5～10质量份蝉花种子培养液和2～5质量份蚕蛹粉混合均匀，分别装入边长为100cm、高3cm的正方形玻璃培养瓶中，铺平并压紧，控制高度为0.5～0.7cm，然后将培养瓶放入蒸汽灭菌锅中于120～125℃灭菌25～35min，冷却至常温，备用；

步骤3：液体种子的制备

从斜面取蝉花菌丝体(市购得到)接种到装有蝉花种子培养液的三角瓶中，置于24～28℃恒温摇床中，以转速120～180rpm培养96～144小时，制备获得一级液体种子；将所述一级液体种子接种到装有蝉花种子培养液的三角瓶中，并置于24～28℃恒温摇床中，以转速120～180rpm培养96～144小时，制备获得二级液体种子；

步骤3中，将蝉花菌丝体接种到装有蝉花种子培养液的三角瓶中时，接种比例为1平方厘米的蝉花菌丝体/100ml蝉花种子培养液；将一级液体种子接种到装有蝉花种子培养液的三角瓶中时，接种的体积比为5％。

步骤4：子实体的培养