[发明专利]一种有效分解水稻秸秆的生物制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种有效分解水稻秸秆的生物制剂，其特征在于，由菌种培养物和载体按照(20-40％)：(60-80％)的重量百分比组成；

其中，所述菌种培养物中各个菌种按照重量百分比的组成为：

2.根据权利要求1所述的一种有效分解水稻秸秆的生物制剂，其特征在于，所述载体中各组分按照重量百分比的组成为：

3.根据权利要求2所述的一种有效分解水稻秸秆的生物制剂，其特征在于，所述载体还包括麦麸和米糠。

4.根据权利要求1所述的一种有效分解水稻秸秆的生物制剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、啤酒酵母菌和根瘤菌组成第一菌种培养物，所述绿色木酶和黑曲霉组成第二菌种培养物，所述第一菌种培养物和第二菌种培养物的重量比例为2:1。

5.一种如权利要求1-4中任意一项所述的生物制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，制备由枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、啤酒酵母菌和根瘤菌组成的第一菌种培养物；

步骤二，制备由绿色木酶和黑曲霉组成的第二菌种培养物；

步骤三，将上述制备得到的第一菌种培养物和第二菌种培养物按照2:1混合得到菌种培养物，将所述菌种培养物与载体按比例混合后过60-100目筛，得到有效分解水稻秸秆的生物制剂。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤一中第一菌种培养物的制备过程包括以下步骤：

第一步，将第一液体培养基在115-130℃灭菌15-30分钟后以100：0.3—0.5混合以下菌液，将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和啤酒酵母菌的混合物按重量比1：50-100的比例接种于上述第一液体培养基混合物中，在25-35℃以150-300转/分的速度搅拌15-25分钟后密闭静置发酵3-5天，抽样检测菌体生长情况和测定PH值，当显微镜下活菌总浓度数超过10亿/ml且PH值达到3-4时停止发酵；所述第一液体培养基由以下重量分计的原料组成：豆粕粉3-5％，大豆粉2-4％，玉米粉1-2％，碳酸氢铵0.01-0.3％，糖蜜2-10％，磷酸二氢钾1.2-2％，硫酸镁0.01-0.8％，硫酸锰0.001-1％和无菌水74.9-90.8％；

第二步，在发酵罐中将第二液体培养基在115-130℃灭菌15-30分钟，开始通入空气，每分钟通入气体的体积与发酵罐的体积比为1：20，将根瘤菌按重量比1：50-100接种于第二液体培养基中，在25-35℃以150-300转/分的速度搅拌15-25分钟后静置发酵，抽样检测菌体生长情况，当显微镜下活菌总浓度超过10亿/ml，停止通入空气，停止发酵；所述第二液体培养基由以下重量分计的原料组成：甘露醇10-20％，豆粕粉2-10％，糖蜜2-10％，玉米粉2-10％，磷酸二氢钾0.5-1％，磷酸二氢钠1-2％，硫酸镁0.3-1％和无菌水46-82.2％；

第三步，分别将第一步和第二步所得的菌种培养物以2000-4000转/分的转速离心5-25分钟，并在42-45℃干燥10-12小时使含水量降低到30％以下。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤二中第二菌种培养物的制备过程包括以下步骤：

第一步，挑取长势良好的黑曲霉斜面孢子接入麸曲瓶培养基，塞上棉塞并包扎好牛皮纸，用力摇匀，30-35℃下培养6-7天，孢子长满培养基后冷藏备用；其中，所述麸曲瓶培养基由以下重量分计的原料组成：麸皮60％、玉米芯35％、硫酸铵3％、磷酸二氢钾2％；

第二步：挑取绿色木霉斜面孢子共同接入种子瓶培养基，扎好纱布，30-35℃下摇床培养48小时；其中，所述种子瓶培养基由以下重量分计的原料组成：蔗糖2％、地瓜汁2％、蛋白胨2％、硫酸铵0.6％、磷酸二氢钾0.3％、硫酸镁0.3％；

第三步：将培养结束后的液体种子接种121℃高压灭菌的浅盘固体发酵培养基，搅拌均匀，30-35℃培养8-10天；其中，所述浅盘固体发酵培养基由以下重量分计的原料组成：麸皮50-80％、稻草粉25-50％、硫酸铵1-5％、磷酸二氢钾1-5％、碳酸钙1-5％、硫酸镁0.1-1％、氯化钙0.1-1％、氯化钠0.1-1％。