[发明专利]一种斜带石斑鱼抗菌肽及其应用

说明书

本发明公开了一种斜带石斑鱼抗菌肽，抗菌肽为斜带石斑鱼CD59蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，或者是SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个氨基酸和/或末端修饰且具有同等或更高活性的蛋白。本发明提供的一种斜带石斑鱼抗菌肽，经实验证明可以抑制溶藻弧菌的生长活性，可以应用于制备鱼类尤其是石斑鱼免疫制剂或饲料添加剂，具有广阔的应用前景；本发明首次获得了斜带石斑鱼的CD59基因序列，不仅丰富了石斑鱼的基因库，而且可以应用于制备重组蛋白、抗菌抑菌添加剂和鱼类免疫制剂，为斜带石斑鱼的生理免疫研究提供了新的实践基础。

技术领域

本发明属于基因工程研发技术领域，具体涉及一种斜带石斑鱼抗菌肽及其应用。

背景技术

斜带石斑鱼(Epinepheluscoioides)属于鲈形目(Perciformes)，鮨科(Serranidae)，石斑鱼亚科(Epinephelinae)，石斑鱼属(Epinephelus)，是暖水性的礁栖鱼类，在印度洋和太平洋的热带、亚热带海域广泛分布。石斑鱼属于名贵海产鱼类之一，其肉质鲜美，倍受各地消费者的喜爱，经济价值巨大。但是，由于面对着目前的急剧的气候变化灾害和严重污染的水质问题，从而导致了其致病率和死亡率居高不下，对石斑鱼的人工养殖造成严重的经济打击。溶藻弧菌是常见的病源菌，石斑鱼感染溶藻弧菌发病后养殖上经常使用抗生素进行处理，这不仅给环境带来二次污染还带来食品安全问题，从而严重地制约了石斑鱼养殖行业的有效发展。研究开发安全有效的生物抗菌剂对于石斑鱼养殖行业可持续发展有重要实际意义和应用价值。

CD59蛋白属于白血球抗原6超家族，是一类机体内广泛分布的糖蛋白，包含有了4-5个保守的二硫键的三指结构域。另外，CD59蛋白包含有一个能够结合于细胞磷脂双分子层的GPI锚定结构域。尽管白血球抗原6超家族成员都含有一个保守的“CCXXXXCN”结构域，只有CD59蛋白能够对补体系统进行调控，而且CD59蛋白上的二硫键结构也参与了补体系统的抑制作用。众所周知，补体信号的激活全部集中于下游的MAC组分，不过CD59蛋白能够通过直接与C8a或者C9b直接结合，从而有效地抑制C9参与C5b-9组装的过程。另外，最近的研究发现，CD59蛋白也能够作为一个多功能的信号分子，对机体免疫行使着非依赖于补体途径的免疫调节作用，能够直接参与T细胞的激活，也能够通过调控胞外分泌蛋白VAMP2和Syntaxin-1从而调节胰岛素的分泌，还可以通过调控DAF的表达从而引起肿瘤细胞的生长。虽然一些学者对斑马鱼(Sun等，2013)、尼罗罗非鱼(Gan等2015)、大黄鱼、虹鳟和斑点叉尾等鱼类中CD59蛋白均有研究(Liu et al,2007；Papanastasiou et al,2007；Yeh et al,2007)，但是将斜带石斑鱼CD59蛋白用于抑制溶藻弧菌生长暂未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种斜带石斑鱼抗菌肽及其应用。

本发明所采取的技术方案是：

一种斜带石斑鱼抗菌肽，抗菌肽为斜带石斑鱼CD59蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示，或者是SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个氨基酸和/或末端修饰且具有同等或更高活性的蛋白。

SEQ ID NO.1：

MKRSLGICLVICSALIGLGSAIRCYSCKDYTASCTKQRECSYDDACLTLTERGGMTYRQCLKYSDCEYGRLSQMFPQVSSFTFKCCNSDLCNSAPSSASMSVIGLLASAAVMWWCIH。

编码上述斜带石斑鱼抗菌肽的基因。

进一步地，基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

SEQ ID NO.2：