[发明专利]一种从油茶饼粕中提取高纯卵磷脂的方法

说明书

本发明涉及一种从油茶饼粕中提取高纯卵磷脂的方法，其特征在于采用以下步骤：A、取适量液体培养基配制菌种浓度为1.0×10⁵‑1.0×10⁶CFU/mL的菌悬液，所述菌种为康宁木霉，菌种保藏号为CICC 13006；发酵摇瓶中进行扩培，得康宁木霉发酵种子培养液；B、将油茶饼粕干燥、粉碎，得油茶饼粕粉末；将油茶饼粕粉末、蒸馏水、液体培养基投入发酵罐供氧发酵2‑3d，得油茶饼粕发酵液；C、将亚临界二氯甲烷与正己烷按特定比例混合作为萃取剂，将油茶饼粕发酵液与萃取剂按质量比2.0‑4.0：1.0加入到亚临界提取装置进行萃取，得油茶饼粕磷脂提取物；D、利用柱色谱分离纯化油茶饼粕磷脂提取物，得卵磷脂。本发明具有提取压力低、温度低，原料成本低，提取效率高，所得卵磷脂纯度高的有益效果。

技术领域

本发明涉及天然植物提取技术领域，特别涉及一种从油茶饼粕中提取高纯卵磷脂的方法。

背景技术

卵磷脂是磷脂酰胆碱（PC）的俗称，作为最具代表性的磷脂成分，它具有保护肝脏、防止动脉硬化、促进婴儿脑部发育等诸多药理活性，应用于化妆品领域，则具有消除色斑、滋润柔软肌肤的作用，还可作为脂质体制备中活性成分的包裹材料。油茶（Camelliaoleifera Abel.）属山茶科山茶属植物，为多年生乔木或灌木，其油茶籽经榨油后得到大量副产品油茶饼粕，约占总含量65%，它含有丰富的蛋白质、糖类、磷脂、茶皂素、黄酮苷类活性成分，大部分被直接丢弃，造成油茶饼粕资源的巨大浪费。本发明以油茶饼粕为原料提取高纯度卵磷脂，降低成本，产品纯度能够满足化妆品领域应用需求的同时，还可以废物利用。

目前，磷脂的提取方法主要有溶剂提取和无溶剂提取两类。溶剂提取法耗费时间长、活性物质易被破坏，且卵磷脂纯度偏低，应用于化妆品脂质体的制备领域时存在乳化力不够，不能够很好地包裹活性成分，稳定性差等缺点。无溶剂提取法存在生产成本高、设备操作复杂等问题。

因此，寻求一种低成本、高效率、高纯度、对磷脂成分破坏性低的提取方法很有必要。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种从油茶饼粕中提取高纯度卵磷脂的方法，该方法具有原料成本低，卵磷脂的提取率高，所得卵磷脂纯度高的优点。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：一种从油茶饼粕中提取高纯卵磷脂的方法，其特征在于采用以下步骤：

A、 无菌条件下，取适量液体培养基配制菌种浓度为1.0×10⁵-1.0×10⁶CFU/mL的菌悬液，所述菌种为康宁木霉，菌种保藏号为CICC 13006，所述液体培养基为含8.0-12.0g/L果糖、6.0-10.0g/L麦麸、12.0-16.0g/L蛋白胨、0.1-0.3g/L尿素的MS液体培养基；取0.4-0.6mL菌悬液在PDA固体培养基表面划线，在25-30℃条件下培养3-5d；挑取分散较好的单菌落接种至含有液体培养基成分的发酵摇瓶中进行扩培，置于气浴恒温振荡器内，在25-30℃，250r/min条件下供氧培养5-7d，气浴恒温振荡器内的氧浓度为0.030-0.050mol/L，得康宁木霉发酵种子培养液；

B、将油茶饼粕在60℃真空干燥箱中烘干，然后粉碎至40-80目，得油茶饼粕粉末；按质量比1：20称取油茶饼粕粉末和蒸馏水投入到发酵罐中，然后注入适量液体培养基；称取油茶饼粕粉末质量8.0-15.0%的康宁木霉发酵种子培养液注入发酵罐；用乙酸调节发酵罐内液体pH值至3.5-5.5，在25-30℃条件下供氧发酵2-3d，氧浓度控制在0.030-0.050mol/L，发酵完成后真空干燥至水份含量为20%，得油茶饼粕发酵液；