[发明专利]人-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备

说明书

一种用于医学领域的人‑鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备，其特征在于，以促红细胞生成素为诱导剂，培养Rh阳性“O”型人骨髓细胞，以增加定向发育的红系细胞，继之将培养后的人骨髓细胞与鼠骨髓瘤细胞融合为杂交细胞，再以促红细胞生成素诱导杂交细胞定向分化，以HAT筛选杂交细胞克隆，以Rh抗体筛选能在体外无限扩增的Rh阳性细胞杂交株，经产业化扩增后作为吸附剂，制成吸附器，然后与血液分离器共同构成体外吸附装置，通过吸附母胎血型不合孕妇外周血浆中的致病性Rh抗体，创建不清除血浆及其有益成份的无需血浆置换液的廉价安全的母胎血型不合溶血病的治疗新方法。

技术领域

本发明涉及医学领域母胎血型不合治疗杂交株的制备，主要用于母胎Rh血型不合孕妇血浆中抗胎儿红细胞抗体的吸附清除。

背景技术

人类有ABO、Rh、MN、Lew和Kell等26种血型，其中最重要的是ABO血型和Rh血型，ABO血型根据红细胞携带的A抗原、B抗原、AB抗原或无A和B抗原分为A型、B型、AB型和O型；Rh血型根据红细胞是否携带D抗原分为Rh阳性和Rh阴性，Rh阳性的红细胞上含有D抗原，能与抗-D血清发生免疫凝集。在我国汉族人群中Rh阴性的频率约为0.4％，而西北地区少数民族以及某些国家Rh阴性的频率高达10％以上，所以这些地区和国家Rh血型不合溶血病的发生率较我国汉族人群高。

血型抗原遗传自父母双亲，胎儿红细胞可以携带来自于父亲的血型抗原，表现为不同于母体的血型，此时当胎儿的红细胞进入母体的血液循环时，可诱发母体产生抗体，进而通过胎盘进入胎儿体内，结合并破坏胎儿红细胞，导致胎儿和/或新生儿的溶血病。其中母胎ABO血型不合的发生率较高，但胎儿溶血病的发生率较低，即使发生亦较轻，极少引起核黄疸和水肿，妊娠期无需特殊处理。而Rh血型不合由于Rh阴性母体产生大量的抗Rh阳性胎儿红细胞的Rh抗体(IgG抗-D)，进入胎儿血液循环后，IgG抗-D与Rh阳性胎儿红细胞表面的D抗原发生免疫结合，致使大量的胎儿红细胞被破坏，使胎儿严重贫血、缺氧、心衰、肝脏损伤、低蛋白血症、全身水肿、胸水、腹水甚至胎死宫内。在新生儿时期，Rh血型不合溶血出现黄疸的时间较ABO血型不合溶血者早，最早可在出生后12小时内出现，多数在24小时内出现。由于溶血产生的大量胆红素不能及时排除，使新生儿黄疸加重，大量的胆红素渗入脑细胞而引起核黄疸，常死于严重贫血、心力衰竭、核黄疸，死亡率很高。

虽然某些孕妇可通过预先注射Rh抗体来预防母胎Rh血型不合溶血病的发生，但目前大多数国家已禁止使用D抗原免疫志愿者，因此多克隆Rh抗体的来源已十分有限，而将EB病毒转化淋巴细胞或先转化后杂交制备的Rh抗体用于体内，仍存在EB病毒、HIV和肝炎病毒等病原体的潜在致病性问题，以及用杂交瘤技术制备的Rh抗体因带有鼠癌基因或含有鼠源蛋白而易引起过敏反应等，从而使通过体内注射Rh抗体预防Rh溶血病的方法受到了限制。