[发明专利]猴-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备

权利要求书

1.一种猴-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备，其特征在于，在骨髓细胞融合前的细胞增量培养及在增量培养后的骨髓细胞与鼠骨髓瘤细胞的融合、杂交细胞筛选、克隆化培养和传代扩增中，以促红细胞生成素刺激红系的定向分裂、Rh抗原的分化成熟，制成能在体外无限扩增的Rh阳性“O”型恒河猴红细胞杂交株，用于制备吸附器，进而与血浆分离器构成母胎血型不合致病抗体吸附治疗装置。

2.根据权利要求1所述的猴-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备，其特征在于，在骨髓细胞融合前的细胞增量培养中，将促红细胞生成素按2.5～3.5IU/mL的用量配入常规骨髓细胞培养基。

3.根据权利要求1所述的猴-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备，其特征在于，在细胞融合、杂交细胞筛选、克隆化培养和传代扩增中，将促红细胞生成素按1.5～2.5IU/mL的用量配入15％胎牛血清的DMEM培养基。

4.根据权利要求1所述的猴-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备，其特征在于，所述Rh阳性“O”型人红系杂交株以0.04mol/L Na₂HPO₄和0.04mol/L NaH₂PO₄配制的渗透浓度分别为25mmol/L和35mmol/L的PB裂解液交替洗涤其含有的血红蛋白。

5.根据权利要求1所述的猴-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备，其特征在于，所述吸附器内部灌注以含3.5％甘露醇的细胞保存液配成的80％Rh阳性“O”型恒河猴红细胞杂交株浓度的细胞悬液，用于吸附流经吸附器的血浆中的Rh抗体。

6.根据权利要求1、5所述的猴-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备，其特征在于，所述3.5％甘露醇的细胞保存液为甘露醇17.5g、枸橼酸三钠1.5g、枸橼酸0.2g、葡萄糖7.93g、磷酸二氢钠0.94g、腺嘌呤0.14g、氯化钠4.97g，溶于500ml的蒸馏水中。

7.根据权利要求1、5所述的猴-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备，其特征在于，所述吸附器的外壳容积为200～300ml，进口处设有缓冲区和顶径细胞筛网，顶径细胞筛网目数为500目，出口处设有底径细胞筛网和细胞滤网，底径细胞筛网目数为50目，细胞滤网目数为200目，底径细胞筛网与细胞滤网之间亦设有缓冲区，有利于系统循环的稳定性。

8.根据权利要求1所述的猴-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备，其特征在于，所述血浆分离器空心纤维滤膜直径为270μm～370μm，膜厚度为50μm，孔径为0.2μm～0.6μm，纤维长度为13.5μm～26μm，能滤过血浆但不能滤过所有的细胞成分。

9.根据权利要求1所述的猴-鼠细胞融合母胎血型不合治疗杂交株的制备，其特征在于，所述致病抗体吸附治疗装置包括动脉血路管(1)的一端经肝素泵(2)和血液泵(3)与血浆分离器(4)相连，血浆分离器(4)经血浆泵(6)和循环管路(7)与两个并联的吸附器(8、9)相连，然后依次与循环管路(10)、静脉管路(5)相连。