[发明专利]一种检测骨钙素的试剂盒及使用方法

说明书

本发明提供了一种检测骨钙素的试剂盒，其检测灵敏度高、可靠性好。一种检测骨钙素的试剂盒，其特征在于，包括校准品、质控品、生物素标记的骨钙素抗体的溶液、辣根过氧化物酶标记的骨钙素抗体的溶液、链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液和底物溶液；校准品包括浓度为0 ng/mL、10 ng/mL、25 ng/mL、50 ng/mL、75 ng/mL、250ng/mL的骨钙素抗原溶液；生物素标记的骨钙素抗体溶液的浓度为1.0μg/mL；链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液的浓度为0.5mg/mL；辣根过氧化物酶标记的骨钙素抗体溶液的浓度为1.0μg/mL。

技术领域

本发明属于医疗器械生物类免疫体外诊断领域，具体涉及一种检测骨钙素的试剂盒及使用方法。

背景技术

骨质疏松症是一种静态疾病：发生骨折前的一些非特异性症状常常被忽视:如腰背痛。大多数病例是在骨折后被诊断的 ，相关的并发症大多为骨折，这一点极大地提高了医疗费用。早期诊断能够帮助减少医疗经费。越来越多的医院科室开设了骨质疏松检测，例如：内分泌科、骨科、妇产科、中医科等，并逐渐开始重视收治骨质疏松病人。目前我国的各级医院主要以骨密度作为辅助诊断标准，尚未全面使用骨代谢标志物指标。

骨代谢标志物之一的骨钙素是在骨中含量十分丰富的非胶原蛋白，其总量占骨组织中非胶原蛋白的15%~20%。骨钙素由成骨细胞合成和分泌，与羟磷灰石有较强的亲和力，约50%沉着于骨基质，其余50%进入血循环。骨钙素的主要生理功能是维持骨的正常矿化速率，抑制异常的羟基磷灰石结晶的形成，抑制软骨矿化速率。

通过血清骨钙素可以了解成骨细胞，特别是新形成的成骨细胞的活动状态。骨钙素值随年龄的变化以及骨更新率的变化而不同。骨更新率越快，骨钙素值越高，反之降低。在原发性骨质疏松中，绝经后骨质疏松症是高转换型的，所以骨钙素明显升高；老年性骨质疏松症是低转换型的，因而骨钙素升高不明显。故可根据骨钙素的变化情况鉴别骨质疏松是高转换型的还是低转换型的，对临床研究骨疾病和内分泌代谢性骨病的发病机理﹑研究骨质成分具有重要意义。

在国内，骨钙素检测临床上主要以国外罗氏公司试剂应用为主，国外进口试剂价格非常昂贵，给患者带来很大的经济负担，不利于在基层普及。因此，有待开发一种骨钙素检测灵敏度高与可靠性好的试剂盒，以降低患者使用成本，并提高推广使用。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一种检测骨钙素的试剂盒，其检测灵敏度高、可靠性好；此外，本发明还提供了适用该试剂盒检测骨钙素的方法。

一种检测骨钙素的试剂盒，其特征在于，包括校准品、质控品、生物素标记的骨钙素抗体的溶液、辣根过氧化物酶标记的骨钙素抗体的溶液、链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液和底物溶液；

所述校准品包括浓度为0 ng/mL、10 ng/mL、25 ng/mL、50 ng/mL、75 ng/mL、250ng/mL的骨钙素抗原溶液；

所述质控品包括浓度为25 ng/mL、75 ng/mL的骨钙素抗原溶液；

所述生物素标记的骨钙素抗体溶液的浓度为1.0μg/mL；

所述链霉亲和素标记的纳米磁微粒悬浮液的浓度为0.5mg/mL；

所述辣根过氧化物酶标记的骨钙素抗体溶液的浓度为1.0μg/mL；

所述底物溶液包括溶液A和溶液B，溶液A为含有0.4%鲁米诺，pH9.0的水溶液，溶液B为含有0.06%Na₂B₄O₇ ，pH5.0的水溶液。

进一步的，所述校准品、质控品均由骨钙素抗原与0.1M、pH值为7.2的Tris-HCl缓冲液配制得到，所述骨钙素抗原购自sigma，货号为O5761。