[发明专利]用于免疫检测的微球的制备方法在审
| 申请号: | 201810694550.6 | 申请日: | 2018-06-29 |
| 公开(公告)号: | CN108828209A | 公开(公告)日: | 2018-11-16 |
| 发明(设计)人: | 耿英利;马春霞;甘萍萍;吴昌英;龙腾镶 | 申请(专利权)人: | 迈克生物股份有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/531 | 分类号: | G01N33/531 |
| 代理公司: | 北京派特恩知识产权代理有限公司 11270 | 代理人: | 陈万青;张颖玲 |
| 地址: | 611731 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 微球 制备 免疫检测 标记物 缓冲液 混合溶液 羧基微球 封闭剂 交联剂 试剂盒 孵育 稀释 封闭 | ||
1.一种标记微球的方法,所述方法包括以下步骤:
1)使用缓冲液稀释所述微球和待标记物;
2)得到所述微球与待标记物的混合溶液;
3)加入交联剂进行孵育;
4)加入封闭剂封闭;
其中,所述微球为羧基微球;步骤1)中的缓冲液的pH为6.3~9.5。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤1)中的缓冲液的pH为7.0~9.0。
3.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤1)中的缓冲液是离子强度为3~30mM的Good’s缓冲液,或者是离子强度为10~500mM的氨基酸类缓冲液。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,所述Good’s缓冲液为选自HEPES、MOPS、MES、TES、TAPS和HEPPSO中的一种或更多种。
5.根据权利要求3所述的方法,所述Good’s缓冲液的离子强度为5mmol/L~25mmol/L。
6.根据权利要求3所述的方法,其中,所述氨基酸类缓冲液为中性脂肪族氨基酸缓冲液和/或碱性氨基酸缓冲液。
7.根据权利要求6所述的方法,其中,所述中性脂肪族氨基酸缓冲液为甘氨酸缓冲液和/或丙氨酸缓冲液。
8.根据权利要求6所述的方法,其中,所述碱性氨基酸缓冲液为精氨酸缓冲液和/或赖氨酸缓冲液。
9.根据权利要求3所述的方法,其中,所述氨基酸类缓冲液的离子强度为15mmol/L~300mmol/L。
10.根据权利要求1~9中任一项所述的方法,其中,所述交联剂与微球的重量比为0.5%~4.0%,优选为1.0%~3.5%。
11.根据权利要求1~9所述的方法,其中,所述待标记物为含氨基的待标记物。
12.根据权利要求11所述的方法,其中,所述含氨基的待标记物为选自蛋白质、肽和多肽中的一种或更多种。
13.根据权利要求11所述的方法,所述含氨基的待标记物为抗原和/或抗体。
14.根据权利要求13所述的方法,所述抗体为单克隆抗体和/或多克隆抗体。
15.根据权利要求1~9所述的方法,所述方法还包括:
5)加入保护剂、防腐剂和表面活性剂中的一种或更多种。
16.根据权利要求1~9所述的方法,其中,所述交联剂为EDC、DCC或DIC,优选为EDC。
17.根据权利要求1~9所述的方法,其中,所述方法不包括纯化步骤。
18.根据权利要求17所述的方法,其中,所述纯化步骤采用超滤和/或离心来进行。
19.根据权利要求1~9所述的方法,其中,所述方法不包括分散微球的步骤。
20.根据权利要求19所述的方法,其中,所述分散微球的步骤采用超声或振荡来进行。
21.由权利要求1~20中任一项的方法制备得到的经标记的微球溶液。
22.一种试剂盒,所述试剂盒包括权利要求21所述的经标记的微球溶液。
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