[发明专利]一种重组酵母菌处理含D型氨基酸废水的方法

说明书

本发明公开了一种重组酵母菌处理含D型氨基酸废水的方法，是将是将重组酵母菌加入到含D型氨基酸废水中；所述重组酵母菌含有优化后D‑型氨基酸氧化酶基因，所述优化后D‑型氨基酸氧化酶基因的的核苷酸序列用SEQ ID NO.1所示。本发明的方法解决了废水中D型氨基酸含量偏高，普通活性污泥处理时间长的问题。经过本方法处理的废水完全达到国家二级水排放标准，并缩短废水处理时间。

技术领域

本发明属于废水处理领域，涉及一种重组酵母菌处理含D型氨基酸废水的方法。

背景技术

D型氨基酸的生产技术主要有化学拆分法、生物拆分法、生物转化法等工艺，上述方法在生产中产生的釜残液，母液，设备清洗水等均含有一定量的D型氨基酸。由于大部分D-型氨基酸是自然界不存在的物质，活性污泥中的微生物缺乏相应的酶来代谢D-型氨基酸，使得此类废水的生物处理存在COD下降缓慢，处理时间长的问题，增加了废水的处理成本。

因此，亟需一种减轻D型氨基酸生产企业的环保压力，大幅降低废水的处理费用，提升企业的市场竞争力的生产D型氨基酸所产生废水的处理方法。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种重组酵母菌处理含D型氨基酸废水的方法。

本发明的技术方案概述如下：

一种重组酵母菌处理含D型氨基酸废水的方法，将重组酵母菌加入到含D型氨基酸废水中；所述重组酵母菌含有优化后D-型氨基酸氧化酶基因，所述优化后D-型氨基酸氧化酶基因的核苷酸序列用SEQ ID NO.1所示。

本发明的优点：

本发明采用优化了酵母来源的D氨基酸氧化酶基因得到优化后D-型氨基酸氧化酶基因并重组到毕赤酵母中，使重组酵母菌的D氨基酸氧化酶的表达量和活性均有提高，并将其加入到含D型氨基酸废水中，使含有D-型氨基酸废水在曝气池的处理时间从24小时降低到12小时，使处理后废水符合排放标准，节约了废水处理成本。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

pGAPZ A来源；购自invitrogen公司。

菌株的来源：

大肠杆菌DH5α菌株感受态细胞：购自invitrogen公司。

毕赤酵母菌为x-33：购自invitrogen公司。

实施例1

1.人工合成优化后D-型氨基酸氧化酶基因(生工生物工程(上海)有限公司)，该基因的核苷酸序列用SEQ ID NO.1所示。

2.设计引物

上游引物序列为：5'-GAATTC GCAATGGCACTGGTTGTTGTATTAGGA(SEQ ID NO.2)

下游引物序列为：5'-CTCGAG TCATTATAATTTTGCTTTGAGTTTACGTAA(SEQ ID NO.3)

3.扩增优化后D-型氨基酸氧化酶基因

反应程序：95℃3min

95℃30s

60℃30s

72℃ 2min

30个循环

72℃ 5min

用上海生工SanPrep柱式PCR产物纯化试剂盒，回收PCR产物。