[发明专利]用于修复关节软骨损伤/缺损的间充质干细胞制剂及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201810692499.5 | 申请日： | 2018-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN108865986B | 公开（公告）日： | 2021-11-30 |
| 发明（设计）人： | 张仲文;刘爱兵;刘莹 | 申请（专利权）人： | 马琳;林秀瑾 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/077;A61K35/28;A61P19/02 |
| 代理公司： | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人： | 余光军;张瑞雪 |
| 地址： | 100049 北京市海淀区田*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 修复 关节 软骨 损伤 缺损 间充质 干细胞 制剂 及其 制备 方法 应用 | ||
1.间充质干细胞制剂在制备修复运动导致关节软骨损伤或缺损药物中的用途，其中，所述用于修复关节软骨损伤/缺损的间充质干细胞制剂的制备方法包括：将间充质干细胞与滑膜细胞进行间接共培养，收获共培养后的间充质干细胞，冻存，即得；
所述的间接共培养是将滑膜细胞接种到Transwell培养板的上室，将脐带间充质干细胞接种到Transwell培养板的下室，将接种细胞后的Transwell培养板置于CO2培养箱中进行共培养；所述的滑膜细胞来源于人健康滑膜组织；
所述滑膜细胞与脐带间充质干细胞按照4:1的接种比例分别接种；
所述的滑膜细胞为P2代滑膜细胞；所述的间充质干细胞为P2代脐带间充质干细胞；所述P2代滑膜细胞的制备方法包括：获得人健康滑膜组织使用酶消化法分离获得P0代滑膜细胞，经传代接种后培养至P2代收集细胞，获得共培养用滑膜细胞；所述的共培养用的P2代脐带间充质干细胞的制备方法包括：通过组织块贴壁培养法获得P0代人脐带间充质干细胞，培养至P2代收集细胞，获得共培养用脐带间充质干细胞；
将冻存的共培养后的间充质干细胞经水浴复苏，用生理盐水洗后、离心，弃上清；以生理盐水为辅剂重悬细胞，调整细胞浓度至10×106个/mL，调整细胞浓度后吸入注射器中待用；所述水浴复苏为将冻存的共培养后的间充质干细胞经37℃水浴复苏，所述的离心为2000rpm离心5min。
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