[发明专利]一种荧光增强型适体传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种荧光增强型适体传感器在高灵敏检测ATP浓度中的应用，其特征在于：所述荧光增强型适体传感器为将ATP的核酸适体与金纳米粒子结合，然后加入修饰有荧光基团标记的ATP的核酸适体互补链，其中ATP的核酸适体为5’端修饰有27～45个碱基A的核酸适体，金纳米粒子与5’端修饰碱基A的核酸适体通过巯基形成共价键，碱基A的总长度为9nm～15nm，所述ATP的浓度检测线性范围为0.5nmol/L～1nmol/L。

2.根据权利要求1所述的一种荧光增强型适体传感器在高灵敏检测ATP浓度中的应用，其特征在于，5’端修饰碱基A的数量为27个且其对应的长度为9nm。

3.根据权利要求1所述的一种荧光增强型适体传感器在高灵敏检测ATP浓度中的应用，其特征在于，所述ATP浓度的检测方法为：将ATP置于荧光增强型适体传感器溶液中，静置，离心，将上清液与沉淀物分别进行荧光检测。

4.权利要求1～3任一项中所述的在高灵敏检测ATP浓度中应用的荧光增强型适体传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：将ATP核酸适体离心，用TCEP稀释至5μmol/L，在室温黑暗无光条件下激活2h，将金纳米粒子溶液与激活后的ATP的核酸适体混合后温育18h，所述金纳米粒子溶液与ATP的核酸适体的体积比为（5～12）:1；

步骤二：加入1×PBS缓冲液，反应6h；

步骤三：加入NaCl溶液，使得总溶液中NaCl的浓度逐渐增加至0.2mol/L，静置至少24h；

步骤四：14℃、15000rpm条件下离心，去除上清液，将所得的沉淀物加入1×PBS中后再离心，最后溶解在1×PBS中；

步骤五：加入被荧光基团FAM标记的ATP的核酸适体互补链，混合，37℃温和振动反应2小时，14℃、15000rpm条件下离心，去除上清液，将所得的沉淀物加入1×PBS中，得到荧光增强型适体传感器。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述金纳米粒子溶液与ATP的核酸适体的体积比为8:1。