[发明专利]一种蛋白质电泳分离纯化方法及其装置在审

专利信息
申请号: 201810690200.2 申请日: 2018-06-28
公开(公告)号: CN108794567A 公开(公告)日: 2018-11-13
发明(设计)人: 滕世超;张宝献;何英福;王猛;郭心怡;李长明;张建璀;刘余江;孟丽丽;张学成 申请(专利权)人: 华兰生物工程重庆有限公司;华兰生物工程股份有限公司
主分类号: C07K1/26 分类号: C07K1/26
代理公司: 重庆中之信知识产权代理事务所(普通合伙) 50213 代理人: 张景根
地址: 408000 *** 国省代码: 重庆;50
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摘要:
搜索关键词: 电泳分离 分离液 纯化装置 种蛋白质 分离纯化装置 电压控制 电泳电源 动力收集 分离效果 强度调整 不带电 等电点 线性流 进液 上样 狭缝 下移 蛋白质 离子 蛋白
【说明书】:

发明公开了一种蛋白质电泳分离纯化方法,使用电泳分离纯化装置将待分离液按照下列所述的步骤进行分离:将待分离液的PH值调整为待分离组分的等电点使待分离组分不带电,待分离液的离子强度调整为0.05‑0.1,其温度控制在0‑6℃;将泳分离纯化装置内的电泳电源电压控制在50‑300V之间,电流为25‑30mA,待分离液进入电泳分离纯化装置的上样进液狭缝的线性流速度为0.7‑1cm/min;待分离液在电泳分离纯化装置中下移,在电泳分离纯化装置下部的等动力收集槽对分离出的各个不同的蛋白组分进行收集;本发明与现有技术相比,实现了蛋白质的批量分离,且分离效果佳。

技术领域

本发明涉及蛋白质分离技术领域,具体涉及一种蛋白质电泳分离纯化方法及其装置。

背景技术

生物大分子蛋白质、多肽类目前的分离纯化方法多为沉淀、离子交换、亲和层析等技术,由于方法的原因决定了分离提纯精度不够高,要想获得高纯度达到药用级别的目标物,通常需要多步才能实现。多步的分离纯化往往会带来活性分子的不同程度损伤,目标物的步步损失,最终造成回收率不高,效益降低。

生物分子的电泳技术,系利用生物分子在溶液环境中其自身表面集团因电离而带有不同性质和不同数量的电荷,将其置入电场中会产生不同方向和速率的位移,从而达到分离分开的效果。目前此技术仅有一维平面电泳,仅能用于检测分析领域,不能用于大批量生产。

发明内容

针对现有技术中所存在的不足,本发明的目的在于提供一种蛋白质电泳分离纯化方法,以解决现有技术中,不能够对蛋白质混合物进行批量分离的问题。

为实现上述目的,本发明采用了如下的技术方案:一种蛋白质电泳分离纯化方法,使用电泳分离纯化装置将待分离液按照下列所述的步骤进行分离:

步骤一:将待分离液的PH值调整为待分离组分的等电点使待分离组分不带电,待分离液的离子强度调整为0.05-0.1,其温度控制在0-6℃;

步骤二:将泳分离纯化装置内的电泳电源电压控制在50-300V之间,电流为25-30mA,待分离液进入电泳分离纯化装置的上样进液狭缝的线性流速度为0.7-1cm/min;

步骤三:待分离液在电泳分离纯化装置中下移,在电泳分离纯化装置下部的等动力收集槽对分离出的各个不同的蛋白组分进行收集。

相比于现有技术,本发明具有如下有益效果:

在电泳分离纯化装置内根据待分离组分的性质,通过对待分离液的进液速度、PH值、离子强度和温度等参数进行控制,使待分离组分不带电,在泳分离纯化装置内不偏移,自上而下直线通过,达到一次性对待分离组分进行分离的目的,提高了待分离组分的分离效率和分离效果,实现了量产的目的。

针对上述所要解决的技术问题,结合本电泳分离纯化方法提供了一种电泳分离纯化装置,包括箱体,所述箱体包括通过正极箱体壁和负极箱体壁形成的呈″八″字形的侧壁和设置在其底部的等动力收集槽,正极箱体壁和负极箱体的内壁上均分别对应为正极侧和负极侧,通过正极侧和负极侧在箱体内形成水平方向上电场,″八″字形的侧壁顶部开有进液狭缝;所述等动力收集槽包括对称设置的左半槽和右半槽,左半槽包括倾斜设置的隔离板和多个分割块,多个分割块等距设置在隔离板与正极箱体壁或负极箱体壁之间,且左半槽中的隔离板和右半槽的的隔离板呈″八″字形设置,两隔离板之间、相邻的分割块之间、隔离板与其相邻的分隔板之间以及正极箱体壁或负极箱体壁与其相邻的分隔板之间均设置有排液管,两隔离板之间的排液管的中心线与进液狭缝的中心线在同一直线上。

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